proyecto
Desarrollo de un Kit de Lps-elisa para el Seguimiento de la Respuesta Inmune contra Piscirickettsiasalmonis
Registro en:
16ITE1-71014
2016-71014-INNOVA_PRODUCCION
Autor
Rodrigo Gustavo Salas Sarabia
Sociedad Adl Diagnostic Chile Spa
Institución
Resumen
Desarrollar Test Inmunoenzimático (elisa). Obtenida la Cantidad Óptima de Agente de Captura(lps) para Unir Igm de Salmón se Evaluará en Microplacas de 96 Pocillos el Formato Adecuado Dedetección Inmunoenzimática con Sueros Control de Peces Naive. Se Estudiará Estabilidad Delformato. Establecer Relación Cuantitativa entre Lps de P. Salmonis e Igm de Salmón. Se Purificará Lps Secuantificará Evaluará y Determinará la Capacidad de Unión a Anticuerpos Anti-srs por Mediode Titulaciones con Cantidades Conocidas de Igm de Salmón. La Piscirickettsiosis o Srs es una Enfermedad Sistémica que Afecta a Salmónidos con una Altamortalidad. Evaluar la Respuesta Inmune por Anticuerpos Inducida por Vacunas es un Indicador de Desempeño Sanitario en Mar Necesario para Determinar Necesidad de Booster. Debido a la Ausencia de Kit Diagnósticos en Mercado el Objetivo General es Desarrollar un Ensayo de Elisa para Cuantificación de Inmunoglobulinas (igm) Anti-srs Utilizando como Innovación un Agente de Captura No Proteico Validar el Test con Muestras Provenientes de Campo y de Ensayos Controlados. El Prototipo Deelisa se Utilizará para Calcular Valores de Corte para Peces Inmunizados Utilizando Sueros Depeces Obtenidos en Condiciones de Campo. Con Pérdidas Anuales por el Orden de los Usd 450 Millones en 2012 la Piscirickettsiosis o Srs Eslejos la Enfermedad Infecciosa que Produce las Mayores Pérdidas Económicas para Lasalmonicultura Nacional. El Agente Causante de la Patología es Piscirickettsia Salmonis Unabacteria Gram Negativa Cuya Manifestación Aguda y Sistémica en la Etapa de Engorda en Agua Demar Produce Alta Letalidad. Esta Patología es la Responsable También del Uso Extensivo Deantibióticos por Parte de la Industria una de las Medidas Más Recurrentes de Contención y Control. Si Bien Existen Vacunas para Prevenir la Enfermedad la Eficacia ha Sido Cuestionada Dado Quemás Bien Retrasan la Aparición del Primer Brote. No Obstante Estudios Recientes Indican que Lainmunización Repetida Podría Mejorar la Eficacia de Dichos Productos Manteniendo de Formasostenida la Respuesta Inmune Adaptativa. En Consecuencia las Vacunas contra Srs Son Unaestrategia que Recoge Aún las Expectativas de Control de la Industria en General Aplicándosemillones de Dosis Cada Año. En el Contexto Anterior una Forma Indirecta de Medir la Performance Oeficacia de una Vacuna es la Determinación del Título de Anticuerpos Post Vacunación. Esteparámetro se Utiliza como Predictor del Desempeño de Peces Vacunados. A Pesar de Laimportancia No Existen en el Mercado Nacional Herramientas Diagnósticas que Permitan Realizardicha Evaluación de la Respuesta Inmune. La Situación Anterior Responde a la Retirada del Mercado Diagnóstico de Kits Inmunológicos y su Reemplazo por las Técnicas Moleculares. Por ello en Laactualidad los Productores No Tienen a su Disposición Resultados Generados por Laboratoriosindependientes que Permitan Medir el Título de Anticuerpos Anti Srs y Así Anticipar la Condiciónsanitaria de sus Peces que Presentarán Frente a Srs en Condiciones de Campo. Por Otra Parteexiste una Necesidad de los Productores de Biológicos por Contar con Evaluaciones Imparciales Desus Productos Dada la Relevancia para el Productor y para la Toma Decisión Respecto de Si Espertinente o No una Nueva Aplicación de Producto o Booster. El Proyecto Aborda la Problemáticaanterior mediante el Desarrollo y Validación de un Ensayo Inmunoenzimático (elisa). Para ello Seutilizará un Antígeno No Proteico Inmunodominante de P. Salmonis el cual Servirá para la Capturade Inmunoglobulinas Específicas contra Srs. La Detección de Anticuerpos Anti-srs en Suero Serealizará por Detección Indirecta con Anticuerpo Conjugado Antiisotipo. La Validación de Lametodología se Realizará con una Colección de Sueros de Campo a Implementar durante Eldesarrollo de la Propuesta. Como Resultado Principal se Espera Disponer de un Ensayo Cuantitativopredictivo de la Condición Inmunológica de Planteles de Peces Frente a Srs que Ayude a la Gestiónsanitaria Mejorando Así la Sustentabilidad de la Industria. Corporación de Fomento de la Producción