proyecto
Obtención de Cepas Atenuadas de Piscirickettsia Salmonis por Métodos Genéticos y Selección de Candidatos para Vacunas Vivas contra la Piscirickettsiosis
Registro en:
15ITE1-45434
2015-45434-INNOVA_PRODUCCION
Autor
Nadine Leslie Campbell Braun X Region
Sociedad Adl Diagnostic Chile Spa
Institución
Resumen
El Objetivo Central del Proyecto es Obtener Cepas Atenuadas de Piscirickettsia Salmonis mediante Herramientas de Genética Molecular como Sustrato para la Elaboración de una Vacuna Viva Atenuada. La Empresa ha Desarrollado Investigación Genómica en P. Salmonis lo que ha Permitido Identificar una Serie de Factores de Virulencia que Estarían Involucrados en la Capacidad Patogénica de la Bacteria. El Proyecto Propone Adaptar Métodos de Genética Molecular para Obtener Cepas Atenuadas de Baja Capacidad Patogénica Capaces de Persistir en el Hospedero Final Induciendo una Respuesta Inmune Celular Efectiva. La Empresa por Medio de este Proyecto Busca Ampliar su Espectro de Aplicaciones a Desarrollar y Comercializar las Cuales se Han Restringido Principalmente a Herramientas Diagnósticas Moleculares. De Esta Forma se Pretende Abrir un Nuevo Nicho de Negocio mediante el Licenciamiento de este Tipo de Cepas con un Valor Comercial Potencialmente Significativo. La Piscirickettsiosis es una Enfermedad Sistémica que Afecta a Salmónidos Produciendo Grandes Pérdidas Económicas para la Acuicultura Nacional. El Agente Causante es Piscirickettsia Salmonis un Patógeno Bacteriano Gram-negativo de Crecimiento Lento y Nutricionalmente Exigente. A Pesar de que Existen Vacunas para Prevenir la Enfermedad la Piscirickettsiosis Sigue Constituyendo la Principal Causa de Mortalidad por Enfermedades Infecciosas y una Amenaza Real para la Sustentabilidad de la Industria. Una Posible Causa del Efecto de Protección Reducida de las Vacunas Observado hasta Ahora es la Naturaleza Facultativa Intracelular del Patógeno. En este Contexto Vale Mencionar que la Erradicación de Enfermedades Producidas por Patógenos con Características Similares de Crecimiento como Son Mycobacterium Bovis y Brucella Abortus Agentes Causales de la Tuberculosis y Brucelosis Bovina Respectivamente se ha Llevado a Cabo mediante el Uso de Vacunas Vivas Atenuadas. Un Ejemplo Más Cercano es el Desarrollo de Vacunas Atenuadas para Combatir la Francisellosis en Peces. El Estudio de la Patogénesis y Mecanismos de Virulencia que Utiliza P. Salmonis se ha Visto Retrasado por el Lento Desarrollo de Medios de Cultivo Libres de Células que Permitieran su Crecimiento Selectivo. Logrado esto se Pudo Obtener la Primera Secuencia del Genoma de P. Salmonis Recién en 2013. Sin Embargo la No Disponibilidad de Anotación de la Secuencia Limitó su Utilidad para Investigación. Más Recientemente el Laboratorio de Investigación y Desarrollo de Adl Diagnostic Chile ha Contribuido con Secuencias Anotadas de Genomas del Patógeno de Alta Calidad que Dan Cuenta de su Diversidad (bohle Et Al. 2014). Este Hito Científico Permite Ahora por Primera Vez Ubicar en un Mapa los Genes de P. Salmonis y Más Aún Identificar Potenciales Factores de Virulencia. Estos Últimos Son un Requisito Indispensable para Diseñar Estrategias Genéticas que Permitan Obtener Cepas que Sirvan Tanto para Investigación como Materia Prima para la Elaboración de Productos Biotecnológicos Innovadores. La Empresa Cuenta Además en su Staff Permanente Profesionales con Postgrado Altamente Calificados para Llevar a Cabo el Diseño Aplicación y Análisis de Datos Obtenidos con Protocolos de Genética Molecular que Permitan Atenuar Cepas de P. Salmonis. El Proyecto Persigue Obtener mediante la Adaptación y Aplicación de una Serie de Herramientas de Genética Molecular Desarrolladas y Probadas en Otros Modelos Bacterianos un Panel de Cepas de P. Salmonis con Mutaciones Específicas Relacionadas a Genes de Virulencia. Para ello se Combinarán las Estrategias de Liberación de Transposones Mutagénesis Sitio-dirigida por Intercambio Alélico e Inserción de Cassettes de Resistencia Utilizando Vectores Plasmidiales Optimizados para Trabajar con Gammaproteobacterias Clase Bacteriana a la cual Pertenece P. Salmonis. Estos Métodos Genéticos Frutos de una Colaboración con Universidades Extranjeras Serán Implementados en el Laboratorio de I&d de Adl. Mutaciones en las Cepas Seleccionadas Serán Identificadas Genéticamente por Pcr y Secuenciación. Posteriormente las Cepas Serán Caracterizadas Fenotípicamente mediante un Ensayo de Cultivo Celular para la Determinación de Multiplicación Intracelular. Esto Permitirá Hacer un Screening Preliminar de Candidatos los Cuales se Probarán en Ensayos de Seguridad y Eficacia en el Modelo In Vivo. Las Etapas Anteriormente Descritas Son Necesarias para la Obtención de Candidatos a Cepas Atenuadas las Cuales Servirán de Base para la Formulación de una Vacuna Viva Atenuada contra la Piscirickettsiosis una Estrategia de Gran Potencial para la Profilaxis de la Infección y que No ha Sido Aún Explorada. Corporación de Fomento de la Producción