proyecto
Innovar en la Tecnología de Producción de Anticuerpos Anti-tumorales en Leche de Cabras Genéticamente Modificadas
Registro en:
16IDAE-67701
2016-67701-INNOVA_PRODUCCION
Autor
Juan Martinez F.
Centro de Biotecnología y Biomedicina Spa
Fortgen Technologies S/s Ltda
Laboratorio Pasteur S. A.
Institución
Resumen
1- Desarrollar la Producción de un Anticuerpo Monoclonal Anti-tumoral Recombinante en la Glándula Mamaria de Cabras Genéticamente Modificadas y Obtener la Molécula como Materia Prima Activa para su Utilización como Biofármaco-biosimilar. Descripción: a Partir del Diseño Genético del Anticuerpo Anti-tumoral se Generarán Vectores de Transformación para la Modificación Genética de las Células de la Glándula Mamaria de Cabras y su Producción en la Leche. Este Sistema Permite Utilizar a la Cabra como un Biorreactor Vivo que se Auto-regula y Produce Proteínas de Alto Valor Agregado en la Leche durante el Periodo de Lactación y con un Costo Significativamente Menor que la Producción de Anticuerpos Terapéuticos en Fermentadores Artificiales de Cultivo de Células de Mamíferos. La Ventaja del Uso de este Sistema es que los Anticuerpos por Ser Proteínas Complejas Necesitan de la Maquinaria de Secreción de Células de Mamíferos (no Pueden Expresarse en Microorganismos como Bacterias y Levaduras) y las Células Secretoras de la Glándula Mamaria Tienen Estas Características Necesarias para su Obtención. Por Tanto se Espera Obtener una Variante del Anticuerpo Funcional y con Elevada Actividad Biológica a Partir de la Leche de Cabras. 2. - Validar un Proceso de Purificación Operacional del Anticuerpo Monoclonal a Partir del Suero de la Leche Desnatada y Caracterizar Bioquímicamente el Anticuerpo Generado. Descripción: a Partir de la Colecta Diaria de Leche de las Cabras Utilizadas como Biorreactores se Establecerá un Proceso de Separación de los Componentes de la Leche hasta Obtener el Anticuerpo Anti-tumoral en el Suero de Leche que Posteriormente se Purificará mediante un Proceso Cromatográfico de Unión Específica a Matrices de Afinidad. Además el Anticuerpo se Caracterizará en Cuanto a Nivel de Pureza Glicosilación y Reconocimiento del Ligando In Vitro 3. - Validar la Actividad Biológica Anti-tumoral del Anticuerpo Purificado en Modelos Animales. Descripción: se Realizarán Objetivo: Innovar en el Proceso de Expresión y Purificación de Anticuerpos Monoclonales Anti-tumorales como Biosimilares Expresados en la Leche de Rumiantes Genéticamente Modificados. Descripción: la Expresión de Anticuerpos Anti-tumorales Producidos en las Células de la Glándula Mamaria de Rumiantes Puede Constituir una Alternativa Promisoria a la Producción de Anticuerpos Terapéuticos de Alto Costo en Sistemas de Biorreactores. Específicamente los Anticuerpos Son Proteínas de Estructura Terciaria y Cuaternaria Compleja Pues Están Constituidos por la Asociación de 4 Proteínas Independientes (dos Cadenas Pesadas y Dos Cadenas Ligeras) que se Codifican en Dos Genes Independientes. Esto Resulta Complejo para los Diseños Genéticos Enfocados a Lograr la Transformación Celular. Nosotros Hemos Diseñado a Nivel de Laboratorio una Molécula de Anticuerpo Modificada que Contiene las Cadenas Ligera y Pesada Asociadas en una Única Proteína que se Dimeriza y que Está Codificada a Partir de un Único Gen. Esto Facilita el Diseño de las Construcciones para la Transformación Genética y la Expresión en Células de Mamíferos. A Partir de Estas Construcciones Previamente Diseñadas Generadas y Probadas In Vitro nosotros Proponemos Desarrollar un Proceso de Producción del Anticuerpo Anti-tumoral Modificado en la Glándula Mamaria de Cabras mediante la Transformación Genética de las Células Epiteliales Mamarias y Desarrollar un Proceso de Purificación del Anticuerpo Recombinante a Partir de la Leche de los Animales Productores. Por Nuestra Experiencia Previa con la Expresión de Otras Proteínas Complejas en Leche Conocemos que este Sistema Alcanza Niveles de Producción de hasta 2 Gramos de Proteína Recombinante por Litro de Leche. Por Tanto Podríamos Lograr Niveles de Expresión del Anticuerpo Anti-tumnoral Significativamente Superiores a los que se Obtienen Utilizando Sistemas de Expresión en Cultivos Artificiales de Tejidos en Lineas Celulares como Cho o Bhk21 donde los Niveles de Corporación de Fomento de la Producción