Desarrollar un Prototipo de Vacuna contra Prv Basado en Vlp (virus Like Particles) y Aplicación de Biología Sintética.Diseñar y Obtener mediante Biología Sintética Construcciones Genéticas para la Expresión de Antígenos de Prv-1 Prv-2 y Prv-3.No AplicaObtener Antígenos Particulados en Forma de Vlps de Prv-1 Pr-2 y Prv-3Obtener Prototipo de Vacunas contra Prv Evaluadas en PecesLa Producción de Salmónidos se ha Visto Afectada por Enfermedades Emergentes Dentro de ellas el Llamado Síndrome de Inflamación del Músculo Esquelético y Cardíaco (hsmi) la que Causa Importantes Detrimentos en Características Productivas del Salmón y su Causa Está Relacionada con un Nuevo Tipo de Orthoreovirus Denominado Piscine Reovirus (prv) Pero Muy Diferente a Otros Reovirus que Afectan a Peces como Son los Aquareovirus. Hsmi Fue Detectado Hace 8 Años en Centros de Cultivo en Chile y se Presenta en Agua Dulce con una Curva Epidemiológica que Dura entre 45 y 60 Días Alcanzando un Peak de Mortalidad entre 2% al 30% en Chile (m Godoy Fresh Water Summit 2018) su Extensión Afecta a Gran Cantidad de los Centros Acuícolas en Fase de Agua Dulce y Afecta de Forma Especial a los Peces sobre los 25 Gramos. A la Fecha se Han Caracterizado los Tipos de Virus que Están Presentes en la Infección en nuestro País sin Embargo Todavía No Existe en Chile una Vacuna Disponible para Lograr Controlar al Patógeno. En este Proyecto Proponemos Generar un Prototipo de Vacuna Dirigida contra Piscine Reovirus (prv) a Través de la Generación de Partículas Virales Vacías (vlp) como Antígeno Particulado e Inmunogénicamente Activo Pero Incapaz de Causar Infección. a Partir de un Estudio Bioinformático del Genoma de Prv se Diseñarán y Sintetizarán las Secuencias de Adn que Codifican para las Proteínas Estructurales e Inmunogénicas Más Relevantes. Para ello se Utilizará la Información de la Base de Datos de Genbank Publicada en Forma del Genoma de Prv y Todos los Segmentos Virales que Codifican para las Proteínas Estructurales. el Conocimiento Previo del Equipo de Trabajo sobre la Estructura Genética y Proteica de Reovirus Aviar Nos Permitirá Enfocar la Expresión de Proteínas hacia las Proteínas Lambdas y Sigmas Responsables del Ensamblaje de la Partícula Viral Icosahédrica Mínima para la Inserción de Sigma 1 la Proteína Más Antigénica de este Virus. Tal como Hemos Demostrado Previamente para Avian Reovirus se Espera que los Productos de Traducción Puedan Autoensamblarse en Forma de Vlp y Constituir los Antígenos Particulados Vaccinales (componentes de la Cápside Viral) que Generen Posteriormente una Respuesta Inmune Específica contra el Virus. Con Estas Secuencias se Co-transfectarán Células de Insecto Junto al Genoma Baculoviral para Generar los Baculovirus Recombinantes los que Serán Purificados y Caracterizados para Seleccionar los Mejores Clones Baculovirales. Posteriormente los Baculovirus que Expresen Óptimamente las Proteínas Estructurales de Prv Serán Usados para Infectar Cultivos de Células de Insecto donde se Producirá el Fenómeno de Autoensamblaje Característico de las Proteínas de la Cápside de Virus Icosaédricos. Se Harán Formulaciones de Prototipos Vaccinales Estables Manofacturados con un Adyuvante e Inmunoestimulantes Aprobadas por el Sag los que se Probarán en Seguridad y Evaluación de Respuesta Inmune en Peces en Esta Etapa Esperamos Lograr una Formulación Capaz de Inducir la Secreción de Anticuerpos Específicos contra las Vlps y la Expresión de Rna Mensajero de Marcadores Moleculares Importantes para la Inmunidad de Salmonídeos como Ifn-g Proteína Mx Cd4 Cd8 y Nk-ef en los Peces Inmunizados. También se Evaluará la Razón Costo/beneficio para un Desarrollo a Mayor Escala.Corporación de Fomento de la Producción