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Development of a multiplex PCR for the identification of Staphylococcus spp. as a cause of caprine mastitis
Desarrollo de una PCR múltiple para la identificación de Staphylococcus spp. como causa de mastitis caprina
Registro en:
10.4067/S0301-732X2013000300015
Autor
Ruiz-Romero, R. A.
Cervantes-Olivares, R. A.
Martínez-Gómez, D.
Ducoing-Watty, A. E.
Hernández-Andrade, L.
Institución
Resumen
"Mastitis" refers to inflammation of the mammary gland. Despite the economic losses that it causes in dairy goats, there is scarce information about the epidemiological status of the disease in Mexico. The aim of this study was to develop a multiplex polymerase chain reaction (PCR) test to diagnose Staphylococcus agents involved in caprine mastitis. Milk samples from animals in intensive and semi-intensive production systems were taken from two farms located at Tequisquiapan, Queretaro, Mexico. The samples were obtained from healthy goats. The multiplex PCR was developed to identify coagulase-negative Staphylococcus and S. aureus. To achieve the identification of Staphylococcus spp, primers for the 16s rRNA region were used. Another two pair of primers were used for S. aureus, the first pair corresponded to the clfA gene and the second pair corresponded to the S. aureus coa gene. Multiplex PCR was performed in 30 milk samples and it was possible to detect S. aureus and coagulase-negative Staphylococcus. Further studies are needed to evaluate the sensitivity and specificity of this technique.
La mastitis se refiere a la inflamación de la glándula mamaria, a pesar de las pérdidas económicas que produce en cabras lecheras, existe poca información acerca de la situación epidemiológica de la enfermedad en México. El objetivo de este estudio fue desarrollar una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) múltiple para el diagnóstico de Staphylococcus spp como agente involucrado en mastitis caprina. Se colectaron muestras de leche de cabras clínicamente sanas en sistemas de producción intensivo y semi-intensivo de dos granjas ubicadas en Tequisquiapan, Querétaro, México. La PCR múltiple se desarrolló para identificar a los Staphylococcus coagulasa-negativos (SCN) y a Staphylococcus aureus. Para lograr la identificación del género Staphylococcus spp se utilizó el par de iniciadores correspondientes a la región 16s RNAr, para el caso de S. aureus se utilizaron 2 pares de iniciadores, el primer par de iniciadores corresponden al gen clfA y el segundo par corresponden al gen coa de S. aureus. Se realizó la PCR múltiple a 30 muestras de leche de cabra en donde se pudo detectar a S. aureus y a SCN, sin embargo, estos estudios son preliminares por lo que se requiere de estudios posteriores para evaluar la sensibilidad y especificidad de esta técnica.
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