A convenience sample from 76 cats from the city of Valdivia, Chile was selected between April and September 1999 to detect Bartonella henselae antibodies. The cats were from the Veterinary Teaching Hospital of the Universidad Austral de Chile and several private clinics. The presence of antibodies to Bartonella henselae was tested for by indirect immunofluorescence. Descriptive data on sex, age, indoors and outdoors activity and flea infestation were recorded. Fifty four (71.0%) cats were for Bartonella henselae antibody positive. Seroprevalence was 68.4% in males and 73.7% in females. Cats 3-6 years old had a higher antibody prevalence than younger and older cats. Twenty nine (69.0%) cats that lived completely indoors and 25 (73.5%) cats that lived mostly outdoors were seropositives. Fifty (75.0%) cats reported to be infested with fleas had B. henselae antibodies. Human sera were obtained from 22 asymptomatic adults owning Bartonella henselae seropositives cats. Four persons (18%) showed serological evidence of infection.Con la finalidad de detectar anticuerpos contra Bartonella henselae, se obtuvo sangre de una muestra de conveniencia de 76 gatos mestizos, de ambos sexos, de 3 meses a 9 años de edad, concurrentes al Hospital Veterinario de la Universidad Austral de Chile y a otras clínicas privadas de la ciudad de Valdivia, Chile. El diagnóstico serológico se realizó mediante inmunofluorescencia indirecta. Además, se consignaron datos descriptivos sobre raza, sexo, edad, actividad y presencia de pulgas de cada uno de los gatos en estudio. De los animales muestreados, un 71% presentó anticuerpos contra Bartonella henselae. La seroprevalencia fue de 68.4% en machos y 73.7% en hembras. Los animales con mayor porcentaje de seropositividad fueron los gatos de 3 a 6 años de edad. Veinte y nueve (69.0%) gatos que pasaban la mayor parte del tiempo dentro de la casa y 25 (73.5%) que permanecian casi todo el día fuera de la casa resultaron seropositivos. De los animales que presentaron pulgas, 50 (75.0%) tenían anticuerpos contra B. henselae. De las 22 personas dueños de gatos positivos a Bartonella henselae, 4 (18%), evidenciaron anticuerpos contra esta bacteria.