The water exploitation at Manaus city, Amazonas State, Brazil, takes place from Negro River and tubular wells, being performed by a private company. This paper evaluates the hydrochemistry and geochemical behavior of uranium isotopes (238U and 234U) in groundwaters from Manaus city, with the aim to characterize the contaminants or pollutants that possibly are affecting the quality of the underground hydrological resources, as well as to evaluate the potential use of the natural U-isotopes as hydrological tracers in the aquifer studied. The U-isotopes analysis allowed to determine 234U/238U activity ratios of 1.2-4.4, and dissolved uranium concentration of 0.003-1.1 μg.L-1 (ppb). These results and those concerning the others parameters indicated that the waters are appropriate for human consumption, permitting to classify the hydrological system as acid-reducing, and to say that the waters leach minerals in strata containing low U content.O abastecimento de água no município de Manaus, Estado do Amazonas, Brasil, é realizado por empresa particular, através da captação das águas do rio Negro e por poços tubulares. Este trabalho tem por objetivo investigar tanto a hidroquímica quanto o comportamento geoquímico dos isótopos de urânio 238U e 234U nas águas subterrâneas de Manaus, de maneira a proceder à caracterização de contaminantes ou poluentes que possam estar afetando a qualidade dos recursos hídricos em sub-superfície, bem como avaliar a potencialidade do uso dos isótopos naturais de urânio como traçadores hidrológicos no aqüífero estudado. No que diz respeito aos isótopos de urânio, verifica-se que foram determinados valores de razão de atividade 234U/238U entre 1,2 e 4,4 e de concentração de urânio entre 0,003 e 1,1 μg.L-1 (ppb). Esses resultados e os determinados para outros parâmetros analisados permitiram identificar que as águas estudadas são adequadas para o consumo humano e também classificar o sistema hídrico como redutor ácido, com circulação das águas por estratos contendo minerais com baixas concentrações de urânio.