Desenvolvimento de carreadores lipídicos nanoestruturados via dupla emulsão para encapsulação do mRNA

Abstract

As vacinas de mRNA são uma alternativa promissora em relação as vacinas convencionais, devido à sua rápida fabricação, versatilidade e administração segura. No entanto, esse tipo de vacina suscita o uso de um sistema de entrega avançado para proteção e internalização do RNA nas células. Dessa forma, atualmente o sistema de entrega de gene não viral mais avançado clinicamente são os carreadores lipídicos nanoestruturados (CLNs), por sua capacidade de proteger o antígeno e por possuir em sua composição materiais lipídicos biocompatíveis e biodegradáveis que melhoram a transfecção da molécula de interesse. O presente trabalho tem como objetivo produzir CLNs a base de cera de abelha e lecitina, para a encapsulação do mRNA, pela técnica de dupla emulsão, livre de contaminações, visando o tratamento de doenças virais. Para a realização dos testes, foi utilizado RNA Poly (I:c), os CLNs apresentaram diâmetro médio de 311,6 nm, com dispersão de 0,2 indicando um sistema parcialmente monodisperso. Para o desenvolvimento de um sistema livre de contaminações foi necessário o ajuste de parâmetros visando a melhor emulsificação e dispersão da formulação, para isso utilizou-se o fármaco doxorrubicina, para que assim posteriormente fossem realizados os testes com o RNA, nesse sistema foi necessário a utilização do clorofórmio para que a cera de abelha fosse emulsionada. Após o preparo das CLNs. A etapa seguinte foi realizar a diálise da formulação por um período de 72 h, para que todo o solvente fosse removido. Os resultados mostraram que a técnica de dupla emulsão foi capaz de encapsular o fármaco, obtendo uma eficiência de 82%, no entanto o ensaio realizado em placa de 96 poços para determinar a EE% do RNA foi inconclusivo, pois a alta concentração de nanocápsulas injetada nos poços causou a morte das células. Sendo assim, os resultados obtidos se mostraram promissores, sendo necessário mais estudos para alcançar a aplicabilidade desse sistema visando a encapsulação do RNA.