Documento avaliado pelos pares
Testagem de primers para mensurar telômeros e a toxicidade de poluentes em peixes
Autor
Sandrieli Gonçalves; Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Dois Vizinhos, Paraná, Brasil
Nédia de Castilhos Ghisi; Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Dois Vizinhos, Paraná, Brasil
Douglas Fernando Zimmer; Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Dois Vizinhos, Paraná, Brasil
Resumen
A cromatina encontrada nos telômeros desempenha a função de proteção contra o encurtamento dos cromossomos. Isto tem grande importância, pois com as divisões celulares os telômeros sofrem senescência replicativa, o que resulta no encurtamento natural, podendo ocasionar danos no DNA. Os peixes são organismos vertebrados, assim como os humanos, deste modo são ótimos bioindicadores contra a toxicidade de substâncias poluentes. Desta forma, realizou-se o bioensaio com peixes juvenis e alevinos de Rhamdia quelen expostos ao herbicida 2,4-D e efluente têxtil (tratado e bruto). O objetivo deste estudo foi testar diferentes primers para amplificar a amostra de DNA de peixes da espécie R. quelen, inicialmente por PCR convencional, e após estabelecido, por PCR – RT, para padronizar um teste de mensuração de comprimento dos telômeros em peixes. A exposição aos poluentes ocorreu em épocas diferentes, ambos os projetos foram aprovados pelo comitê de ética da instituição. Inicialmente, os animais passaram pelo período de aclimatação, posteriormente, ficaram expostos durante sete dias no método semi-estático. Após este período foi realizada a coleta do músculo dos animais, este material foi usado para realizar a extração do DNA, quantificação e amplificação através da PCR. Os resultados foram satisfatórios para a extração e quantificação do material genético, porém a amplificação não ocorreu da forma desejada. Portanto, novas tentativas são necessárias. A amplificação do DNA de uma espécie que não possui primers desenhados é complicada, pois é preciso passar por várias tentativas e erros até obter resultados satisfatórios e instituir um protocolo.
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