Thesis
Potencial condrogénico de as células epiteliales provenientes de la membrana amniótica humana
Autor
Nieves Ponce, Dubelys
Institución
Resumen
Resumen
Uno de los campos de la medicina que más expectativas ha despertado en los
últimos años es la investigación con células madre. Las actuales fuentes de obtención de estas células plantean muchos problemas, tanto éticos como técnicos por lo que el hallazgo de otras opciones que no acarreen dichos inconvenientes, sea de fácil acceso sin que suponga ningún riesgo para el donante y provean un material suficiente y numeroso; han proporcionado grandes progresos en este ámbito. Una nueva fuente que cumple con todos estos requisitos es la membrana amniótica humana, la cual es un tejido descartable
que se compone de una sola capa de células epiteliales, una membrana basal gruesa y un estroma avascular; con dos poblaciones celulares con características de células madre.Las mismas no presentan mutaciones somáticas y son inmaduras desde el punto de vista inmunológico, favoreciendo la compatibilidad.Diversos estudios hacen referencia a la potencialidad de diferenciación de estas células hacia linajes de origen mesodérmico como el condrogénico, mediante el suministro de nichos o microambientes particulares in vitro que pueden dar respuesta en un futuro al establecimiento de técnicas para el abordaje terapéutico de patologías
asociadas al cartílago, ya que debido al comportamiento de los condrocitos en
condiciones de cultivo donde existe un proceso de desdiferenciación, son poco viables para la producción de este tejido por bioingeniería. Basándonos en lo anterior y en los antecedentes de la aplicación de la Membrana Amniótica Humana como biosustrato, que facilita la proliferación y el mantenimiento del
fenotipo de los condrocitos luego de métodos de criopreservación, el objetivo de éste trabajo fue determinar el potencial de diferenciación condrogénica de las células epiteliales provenientes de la membrana amniótica humana. Para ello, se aislaron y establecieron cultivos primarios de células epiteliales provenientes de la Membrana Amniótica Humana para luego subcultivar en sistemas en monocapa y sobre el estroma de la Membrana Amniótica Humana como sistema tridimensional, que permitieron posteriormente realizar los ensayos de diferenciación con el uso de un medio inductor condrogénico. La inducción
hacia el linaje condrogénico se evaluó mediante técnicas histoquímicas como Azul de Toluidina y Azul Alcián pH 2,5. Nuestros resultados indican que bajo los sistemas de cultivos empleados se observa una diferenciación de las células epiteliales, ya que se demostró en mayor o menor medida la presencia de componentes de Matriz extracelular cartilaginosa como Glicosaminglicanos ácidos y Proteoglicanos, siendo importante el
contacto célula – célula, célula – matriz y la acción de factores solubles específicos para el mantenimiento de las células, estimulación de su proliferación y biosíntesis de matriz.
Palabras claves: membrana amniótica, célulasepiteliales,inducción,condrogénico. Nieves Ponce,Dubelys (2018) Potencial condrogénico de las células epiteliales provenientes de la membrana amniótica humana. Trabajo de Grado presentado ante la Universidad Central de Venezuela para optar por el Título de Licenciada en Biología