Thesis
Estudio del papel de los linfocitos TCD8 y Treg en el establecimiento de la respuesta inmune celular frente a la vacuna BCG en niños infectados con VIH bajo tratamiento antirretroviral
Autor
Navarro Sánchez, Eduardo Aníbal
Institución
Resumen
Resumen El blanco primario del virus de inmunodeficiencia adquirida (VIH)son las células TCD4 que exhiben alteraciones cuantitativas y cualitativas; no obstante, el deterioro de la inmunidad medida por células es multifactorial e incluye además la actividad alterada de células TCD8 y de células presentadoras de antígeno. En años recientes se ha demostrado que las células T reguladoras (Treg) tienen u papel importante en la modulación de la respuesta específica al VIH, así como en la patogénesis de esta infección. En la actualidad, la infección por el VIH es uno de los mayores problemas de salud pública. ONUSIDA estimó para el año 2012 que en todo el mundo existen 35,3 millones de personas infectadas, de los cuales 3,3 millones correspondían a niños menores de 15 años. Al menos en un tercio de las personas con VIH están infectadas por el bacilo de la tuberculosis (TB), y corren un riesgo mucho mayor de padecer la TB activa. Ambas infecciones ejercen un sinergismo que generalmente es mortal. El efecto devastante de la epidemia del VIH ha tenido el mayor impacto sobre las poblaciones con alta prevalencia de infección por Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis, y esto ha tenido un profundo efecto en la epidemia de la TB. Con el advenimiento de la terapia antirretroviral de alta eficiencia (TAAE) ha cambiado la historia natural de la infección VIH/SIDA, al retardar la evolución de la enfermedad y mejorar la calidad de vida de los individuos afectados. El tratamiento en el niño, es difícil por la disponibilidad de presentaciones pediátricas en todas las drogas antirretrovirales. Sin embargo, este tratamiento no logra eliminar por completo el virus en el individuo infectado, además la información que se tiene del efecto de TAAE, son capaces de desarrollar una respuesta de inmunización al ser vacunados con la BCG, mediante la realización de ensayos ex vivo e in vitro en la subpoblación de los linfocitos TCD8, así como también estudiar el papel que juegan las células Treg en este proceso de inmunización. Para ello procedimos a determinar el número de células TCD4 y TCD8 (Totales, vírgenes y memoria)sanguíneas, la frecuencia ex vivo de apoptosis en células TCD8, como también la expresión ex vivo de moléculas (Fas, PD-1,IL-7r) es estas células. Para el estudio de efectos de los linfocitos Treg sobre la funcionalidad in vitro de los linfocitos TCD8 utilizamos un protocolo novel de purificación de estás células reguladoras y realizamos cultivos de Células Mononucleares de Sangre Periférica (CMSP) en presencia o ausencia de Treg autólogas y finalmente estudiamos la producción de citocinas Th1 y Th2 en plasma y sobrenadantes de cultivos CMSP. Nuestros resultados sugieren que la infección por el VIH genera un incremento de las subpoblaciones de células TCD8 totales y memoria en sangre, y un descenso en la cantidad de células TCD8 vírgenes, asímismo observamos que la administración de TAAE promueve la estabilización de los valores de las subpoblaciones total y memoria, y un aumento relativo de la cantidad de linfocitos TCD8 vírgenes,así como la disminución significativa de la carga viral. Los linfocitos TCD4, por su parte presentaron una marcada disminución en las subpoblaciones total, vírgenes y memoria a causa de la infección, sin embargo, observamos recuperación parcial en corto tiempo en estas subpoblaciones una vez iniciado el TAAE. Por otra parte, encontramos que la administración del TAAE induce una lenta disminución en la tasa de apoptosis de las células TCD8, presumiblemente, producto de la normalización parcial de la expresión de las moléculas asociadas a este proceso. Nuestros resultados indican que la actividad efectora en presencia de la vacuna BCG. De igual forma, observamos que el TAAE normalizó progresivamente la producción de Il-6, Il-10 y TNF, relacionándose con la normalización de otros parámetros fenotípicos y efectores de los linfocitos TCD8 estudiados. En síntesis nuestro trabajo sugiere que la administración de la vacuna BCG en combinación con una oportuna administración del TAAE, podría incrementar la posibilidad efectiva del establecimiento de protección inmunológica a largo plazo frente a M. tuberculosis en niños infectados por el VIH. Tutor: Dr. Miguel A. Alfonzo Díaz