Thesis
Caracterización del efecto de una toxina purificada del veneno de Tityus discrepans en la señalización de ca2+ intracelular de glias de ganglios de la raíz dorsal
Autor
Guevara Zambrano, Alejandra E.
Institución
Resumen
RESÚMEN
Los escorpiones se encuentran distribuidos por todo el mundo, desde Australia,
África, Asia, Europa hasta en América. Están representados por más de 1.500 especies
hasta ahora incluidas en 18 familias distintas, siendo Buthidae la más grande con 800
especies diferentes y a la que se le han atribuido la mayor cantidad de accidentes
escorpiónicos letales.
El veneno de escorpión está compuesto principalmente por péptidos, enzimas,
lípidos, nucleótidos y aminas biogénicas. En el caso de la especie Tityus discrepans
(T.discrepans), contiene componentes en su mayoría neurotóxicos, algunos de estos
con potencial antibacteriano, antimicótico, procuagulante, anticancerígeno, entre otras
propiedades. Uno de sus componentes es el objeto de estudio de este trabajo.
Por otra parte, las células gliales son de gran importancia para el funcionamiento
adecuado del Sistema Nervioso (SN). Cumplen funciones de mantenimiento u
homeostasis, controlando el medio químico extracelular apropiado para la señalización
neuronal, forman la envoltura de mielina responsable de la conducción saltatoria rápida
de potenciales de acción (PA) y elaboran respuestas que protegen ante cualquier daño
o patología.
Con la finalidad de estudiar el efecto de la fracción 19 (F-19) componente del
veneno de T.discrepans sobre la señalización de Ca2+ intracelular de glias de ganglios
de la raíz dorsal (GRD), se purificaron y aislaron los componentes del veneno completo
por medio de Cromatografía Líquida de Alta Resolución (CLAR). Las respuestas de
Ca2+ en las glias producidas por la aplicación de la F-19 se registraron en tiempo real
mediante la técnica de Imagenología de Ca2+, usando como indicador de Ca2+ citosólico
Fura-2 AM. Todo lo anterior con la finalidad de determinar el blanco de acción de este
componente del veneno.
La aplicación de condiciones y el uso de inhibidores específicos permitió
determinar características importantes del mecanismo involucrado en el incremento en
la [Ca2+]i causado por la aplicación de F-19. Problablemente se trate de un receptor
metabotrópico cuya activación desencadena la liberación de iones Ca2+ desde
reservorios intracelulares. Finalmente, mediante el estudio del efecto de la fracción
sobre la respuesta producida por el ATP en estas células, se determinó que el blanco
fisiológico de la F-19 en células gliales de GRD probablemente es el receptor
metabotrópico de Angiotensina II tipo 1 (AT1R). Este receptor podría estar implicado en
la recuperación de la respuesta al ATP observada después de la aplicación de F-19.
Palabras clave: Tityus discrepans, toxina, calcio, ganglio, raíz dorsal, Imagenología de
Ca2+, Fura-2AM, Angiotensina II tipo 1 (Ang II), Adenosina 5’ trifosfato (ATP), receptor. Tutor: Dra. Cecilia Castillo