Characterization of antigenic tumor lysates for ex vivo activation of dendritic cells against ovarian cancer
Caracterización de lisados tumorales antigénicos para la activación ex- vivo de células dendríticas contra el cáncer de ovario
Fecha
2018Autor
López, Mercedes
UNIVERSIDAD ANDRES BELLO
Institución
Resumen
Ovarian cancer has a high mortality in advanced stages because the therapies currently in use lack effectiveness. We know that the immune system plays a fundamental role since it can favor or limit tumor growth and with it, determine the course of this disease. Currently, various therapies based on manipulation of the immune system are being tested in this type of cancer, such as the use of monoclonal antibodies and dendritic cell (DC) vaccines that have shown encouraging results in various types of cancer such as melanoma, prostate cancer, colon cancer and lung cancer among others. Immunotherapy is one of the most promising tools applied in oncological treatments. Our laboratory has conducted phase I and II clinical studies in patients with advanced melanoma and prostate carcinoma, using activated DCs with conditioned tumor lysates. Our studies showed that components derived from cell lines derived from these cancers, potentiated the immunological response of the DCs and induced an increase in the survival of the treated patients. In this thesis, we propose that conditioned cell lysates derived from ovarian carcinoma lines have the potential to induce the phenotypic and functional maturation of DCs and an efficient activation of the cellular immune response against ovarian cancer. Thus, we characterize the expression of tumor-associated antigens and the generation of danger signals in response to the thermal shock conditioning of 4 ovarian cancer cell lines. Our analyzes showed that one of the lines has antigens that have been related to ovarian cancer and we observed that thermal shock, in all the cell lines studied, the expression of DAMPS was induced, such as HGMB1 and calreticulin. By combining the lines to make the cell lysates, these mixtures efficiently activated the DCs. Finally, we demonstrate that these DCs matured with the different mixtures of ovarian cancer lysates, are able to activate, in an allogeneic and autologous manner, CD4+ and CD8+ T lymphocytes with the ability to recognize and eliminate tumor cells. This study offers an opportunity to contribute to the specific development of effective vaccines against this neoplasm. El cáncer de ovario presenta una alta mortalidad en estadios avanzados debido a que las terapias actualmente en uso carecen de efectividad. Sabemos que el sistema inmune juega un rol fundamental ya que puede favorecer o limitar el crecimiento tumoral y con ello, determinar el curso de esta enfermedad. Actualmente, diversas terapias basadas en la manipulación del sistema inmune están siendo probadas en este tipo de cáncer, como por ejemplo, el uso de anticuerpos monoclonales y vacunas de células dendríticas (DCs) que han mostrado resultados alentadores en diversos tipos de cáncer como melanoma, cáncer de próstata, cáncer de colón y cáncer de pulmón entre otros. La inmunoterapia, es una de las herramientas más promisorias aplicadas en tratamientos oncológicos. Nuestro laboratorio ha realizado estudios clínicos de fase I y II en pacientes con melanoma avanzado y carcinoma de próstata, utilizando DCs activadas con lisados tumorales sometidos a estrés térmico. Nuestros estudios demostraron que componentes derivados de líneas celulares provenientes de estos cánceres, potencian la respuesta inmunológica de las DCs e inducían aumento en la sobrevida de los pacientes tratados. En esta tesis, planteamos que, lisados celulares condicionados derivados de líneas de carcinoma de ovario poseen el potencial de inducir la maduración fenotípica y funcional de DCs y una eficiente activación de la respuesta inmune celular contra cáncer de ovario. Para esto, caracterizamos la expresión de antígenos asociados a tumor y la generación de señales de peligro en respuesta al condicionamiento con shock térmico de 4 líneas celulares de cáncer de ovario. Nuestros análisis demostraron que una de las líneas posee antígenos que se han relacionado a cáncer de ovario y observamos que producto del shock térmico, en todas las líneas celulares estudiadas se indujo la expresión de DAMPS, como HGMB1 y calreticulina. Al combinar las líneas para elaborar los lisados celulares, estas mezclas activaron eficientemente las DCs. Finalmente, demostramos que estas DCs maduradas con las diferentes mezclas de lisados de cáncer de ovario, son capaces de activar, de manera alogénica y autóloga, linfocitos T CD4+ y CD8+ con la capacidad de reconocer y eliminar células tumorales. Este estudio ofrece una oportunidad de contribuir al desarrollo específico de vacunas efectivas contra esta neoplasia.