Se reporta la evaluación de cinco fases móviles para el análisis de cefotaxima por cromatografía líquida de alta resolución con empleo de una columna en fase reversa (RP-18). Se determinan los coeficientes de correlación para cada sistema de disolvente al variar la concentración del analito y se evalúan los cromatogramas por altura de pico y área. De los tres métodos que resultan adecuados, se aconseja emplear el sistema de disolvente formado por metanol-agua-ácido acético (30:70:0,1; V/V/Vd) e pH 3,4 por presentar un mejor perfil cromatográfico, un tiempo de retención adecuado (6,42 min) y un límite de detección de 4 ng.The evaluation of five mobile phases for the analysis of cefotaxime by High Performance Liquid Chromatography with the use of a reverse phase column (RP-18) is reported. The correlation coefficient for each solvent system was determined. Three solvent systems were found to be suitable for the assay of cefotaxime: of them, a mobile phase composed by methanolwater- acetic acid (30:70:0.1, pH 3.4) was the solvent mixture more suitable, as shows a good chromatographic profile, an adequate retention time (6.42 min) and a detection limit of 4 ng.