Caracterización de aislamientos de rizobios nativos que nodulan Prosopis flexuosa en ambientes salinos

Abstract

Los bosques nativos argentinos, con su gran variedad de ecosistemas, brindan distintos servicios ecosistémicos. En función de la variabilidad climática, edáfica y geomorfológica, en la región Monte, la vegetación se caracteriza por ser un mosaico de distintos tipos de comunidades. En la subregión del Chaco árido, rodeada por sierras que actúan como barreras restringiendo las precipitaciones, se encuentras salinas. Tanto en el Monte como en el Chaco árido, crece entre otras especies, Prosopis flexuosa, una leguminosa forestal que además de proporcionar sombra, leña, madera y alimentos, poseen la capacidad de asociarse simbióticamente con rizobacterias para captar nitrógeno atmosférico. El objetivo de este trabajo fue conocer la diversidad de rizobacterias presentes en ambientes de los salares de “Pipanaco” en Catamarca y “La Antigua” en La Rioja, en la región del Chaco Árido, que se asocian en simbiosis con P. flexuosa. Para capturar la diversidad de rizobacterias con capacidad de establecer simbiosis con P. flexuosa, se recolectaron muestras de suelo en dos sitios de cada salar y sembraron semillas de P. flexuosa, 30 repeticiones por sito, en macetas que se mantuvieron 90 días en invernadero, como plantas trampa. En los suelos se determinaron variables químicas y en las plantas, parámetros de crecimiento y nodación. Las plantas trampa que crecieron en suelo proveniente del sitio La Antigua_2 que posee una CE de 62,5 dS/m no desarrollaron nódulos y crecieron significativamente menos. Contrariamente, en suelo de La Antigua_1, donde la CE fue de 9,7 dS/m, P. flexuosa desarrollaron mayor cantidad de nódulos. Las plantas crecidas en suelos de Pipanaco_1 y Pipanaco_2 no mostraron diferencias significativas en el número de hojas, altura ni cantidad de nudos. Se procesaron aproximadamente el 10% del total de nódulos cosechados de los cuales se aislaron rizobacterias para analizar polimorfismos genéticos por medio de repPCR con primer BOX A1R. Los polimorfismos, evaluados por UPGMA a partir de los patrones moleculares de cada sitio, obtenidos en geles de agarosa, permitieron establecer que la mayor diversidad se observó en La Antigua_2. A partir de ello, se seleccionar un conjunto de 21 aislamientos con más de 60% de distancia entre si, según el índice de Dice. Quince de los 21 aislamientos seleccionados de los clusters obtenidos en cada sitio, fueron capaces de crecer en vida libre en medio conteniendo 500mM de NaCl. En un segundo ensayo de nodulación, se inocularon semillas de P flexuosa, en sustrato estéril con los 21 aislamientos de modo independiente con 6 replicas cada uno. A los 60 días se determinaron parámetros de crecimiento y se observó que los aislamientos 13 y 27 aportaron mayormente al crecimiento respecto del control no inoculado y de los otros aislamientos. En los nódulos de crecimiento indeterminados obtenidos en estas asociaciones, se estableció que el N2 fijado en P flexuosa es transportado en forma de ureidos como alantoína y alantoato. Este trabajo aporta información relevante de las interacciones simbióticas que ocurren en áreas salinas en el Chaco Árido, entre P. flexuosa y rizobacterias y ha permitido seleccionar un conjunto de aislamientos candidatos para ser utilizados como inoculantes a fin de mejorar la instalación de plantaciones tantos con fines de restauración como en el establecimiento de rodales con fines productivos. Es, según nuestro conocimiento, el primer reporte para P. flexuosa que el N2 fijado biológicamente se transporta en forma de ureidos.