En este trabajo describimos un método para identificar el sexo en Crocodylus acutus, evaluando testosterona y estradiol en heces fecales y orina. Este método tiene la ventaja de ser no invasivo, en el cual la determinación puede ser colorimétrica, cuando es cualitativa, además de ser cuantitativa, al utilizar un lector de ELISA. Donde las muestras de heces fecales mayores de 1 a 2 g., indican que es efectivo cuando los cocodrilos tienen tallas mayores de 130 cm, para la identificación de testosterona en concentraciones presentes en especímenes mas jóvenes (subadultos), las cuales fueron aproximadamente de 1:5 o de 1:7. En relación a la concentración de estradiol de las hembras y de los machos, se evaluaron también muestras de heces fecales y orina, sin embargo, nuestros resultados no fueron consistentes. Por lo cual hasta este momento sugerimos que los niveles hormonales sean evaluados solo en heces fecales para testosterona.