Identificação de peptídeos ligantes ao anticorpo monoclonal 3C9 que reconhece um oligossacarídeo da superfície de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi

Abstract

O anticorpo monoclonal 3C9 e capaz de inibir eficientemente a infecção experimental pelo T cruzi. Os epítopos reconhecidos por este anticorpo são oligossacarídeos constituídos parcialmente por ácido siálico presentes em toda a superfície de tripomastigotas sangüíneos do T. cruzi, formando uma capa protetora, a qual é alvo da resposta imune humoral. Apesar da importância deste epítopo para a infecção e sobrevivência do parasito, sua natureza bioquímica complexa representa uma dificuldade para sua purificação ou síntese química industrial, o que dificulta avaliar seu potencial imunogênico em experimentos de imunização e inviabiliza sua aplicação prática. Baseados no conceito de mimetismo entre moléculas de natureza bioquímica não relacionada, resolvemos identificar peptídeos capazes de se ligar especificamente ao MAb 3C9 pela metodologia phage display library. Utilizamos uma biblioteca constituida por 109 fagos apresentando peptídeos randômicos formados por sete aminoácidos randômicos flanqueados por duas cisteínas para selecionar ligantes com elevada afinidade e especificidade ao MAb 3C9. Ao término do processo de seleção identificamos três fagos (A2 - CNFSGWQSC, B4 - CLISLLSSC e B9 - CMRVSESAC) apresentando peptídeos que se ligaram especificamente a região variável do MAb 3C9. Esses peptídeos foram sintetizados e poderão ser utilizados em futuros experimentos de imunização para avaliar seu potencial imunogênico.