Receptores muscarínicos em miométrio de ratas adultas e sua modulação pelo estrógeno

Abstract

O objetivo do presente trabalho foi investigar a regulacao dos mecanismos da neurotransmissao colinergica em miometrio de rata, pelo estrogeno. Mais especificamente, avaliar se o tratamento agudo com estrogeno de ratas adultas afeta a afinidade, o numero, os subtipos, e a sinalizacao intracelular dos receptores muscarinicos presentes nesse tecido e, consequentemente, a responsividade miometrial, em relacao a ratas em estro natural. Foram utilizadas ratas femeas, albinas, da colonia BAW com 118 a 122 dias de idade. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais: animais em estro natural (grupo EN) e animais tratados com 25 mg de hexahidrobenzoato de estradiol, 24 horas antes dos experimentos (grupo E-25). O utero foi isolado e o musculo liso miometrial foi separado do endometrio. Os seguintes aspectos foram analisados: peso corporal e peso umido do utero e do miometrio. Estudos de ligacao do [3H]QNB em preparacoes de membranas miometriais dos dois grupos experimentais. - ensaios de cinetica e determinacao da concentracao de proteina, do tempo e da temperatura de incubacao. - ensaios de saturacao e determinacao dos parametros de ligacao, constante de dissociacao (KD) e densidade de receptor (Bmax). - ensaios de competicao e determinacao da constante de inibicao (Ki) e do logaritmo negativo da constante de inibicao (Pki) . Estudo da reatividade farmacologica. curvas concentracao efeito cumulativa de carbacoi e determinacao dos valores de EC5O. - curvas concentracao efeito cumulativa de carbacol, na ausencia e na presenca de antagonistas muscarinicos, atropina, pfHHSiD e metoctramina e determinacao dos valores de pKB. Determinacao da concentracao intracelular de AMP ciclico. nivel basal e efeito do forskolin. efeito do carbacol e de antagonistas muscarinicos, atropina, pfHHSiD e de metoctramina, sobre o conteudo intracelular de AMP ciclico induzido pelo forskolin. Determinacao da formacao de fosfatos de inositol. nivel basal e efeito do carbacol. efeito do carbacol e de antagonistas muscarinicos, atropina, pfHHSiD e de metoctramina, sobre o conteudo intracelular de fosfatos de inositol determinado pelo carbacol. Observamos que: O tratamento estrogenico aumentou o peso uterino dos animais. Porem, nenhuma alteracao foi observada no miometrio. o Houve urna relacao linear entre a ligacao especifica do 3[H]QNB e a concentracao de proteinas de membrana, a ligacao maxima ocorreu com a concentracao de 240 mg/ml. A concentracao de...(au)