masterThesis
Efeito da associação do extrato solúvel de Ascaris suum e N-acetil-L-cisteína no estresse oxidativo na hepatite autoimune experimental
Autor
SILVA, Raul Penaforte Correia da
Institución
Resumen
Estresse oxidativo e inflamação são chave nas doenças hepáticas. Hepatite autoimune é uma doença inflamatória crônica e progressiva, que há relatos de falha terapêutica. Nesse contexto, a presença de enzimas antioxidantes no Ascaris suum e o uso associativo de antígenos de helmintos com moléculas antioxidantes, podem modular positivamente a atividade anti-inflamatória e antioxidante nas lesões hepáticas. A associação do extrato solúvel de A. suum (ASC) e N-acetil-L-cisteína (NAC) atenuou a hepatite autoimune experimental (HAE) através do perfil Th2-anti-inflamatório. Entretanto, os efeitos que esta associação causa no balanço redox na HAE não foram esclarecidos. Para esta avaliação, foram formados os seguintes grupos experimentais: Concanavalina A foi administrada por via intravenosa (i.v.) na dose 20 mg/Kg (grupo HAE). Parte deste grupo recebeu ASC (2h após; 40 mg/Kg), por via intraperitoneal (i.p.) (grupo HAE+ASC), e a outra parte recebeu a NAC (30 minutos; 200 mg/Kg), por via oral (v.o.) e 12 h após (grupo HAE+NAC). Parte do grupo HAE+ASC também recebeu NAC (grupo HAE+NAC+ASC). Grupo Controle recebeu apenas PBS (i.p. e i.v.). Vinte e quatro horas após a administração da Concanavalina A, o homogenato do fígado foi preparado. A lipoperoxidação foi estimada através da ligação do ácido tiobarbitúrico ao malondialdeído (MDA). Glutationa reduzida (GSH) e oxidada (GSSG) foram mensuradas através da ligação com o OPT em pH 8,0 e pH 12,0, respectivamente. A atividade da catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD) foi determinada através da decomposição do H2O2 e inibição da autoxidação da epinefrina, respectivamente. Nos grupos HAE tratados com a NAC e NAC+ASC, houve redução dos níveis do MDA, bem como o aumento da atividade da SOD e da razão GSH/GSSG, em comparação ao grupo HAE. No entanto, estes parâmetros no grupo HAE+ASC foram semelhantes ao Controle e HAE. Atividade da CAT não demonstrou diferença entre os grupos de estudo. Em conjunto esses resultados demonstram que o ASC não promoveu alteração nos parâmetros do balanço redox avaliados na HAE, porém a NAC foi capaz de restaurar o aporte antioxidante. Oxidative stress and inflammation are key in liver injuries. Autoimmune hepatitis is a chronic and progressive inflammatory disease, which has reported therapeutic failure. In this context, the presence of antioxidant enzymes in Ascaris suum and the associative use of helminth antigens with antioxidant molecules, can down modulation anti-inflammatory and antioxidant activity in liver injuries. Association A. suum soluble extract (ASC) and N-acetyl-L-cysteine (NAC) attenuated experimental autoimmune hepatitis (EAH) through Th2-anti-inflammatory profile. However, redox balance effects that this association causes in EAH have not been clarified. Experimental groups formation, Concanavalin A (20 mg/Kg) was administered intravenously (i.v.) (EAH group). Part of this group received ASC (2 h after, 40 mg/Kg), intraperitoneally (i.p.) (EAH+ASC group), and the other part received oral NAC (30 minutes after, 200 mg/Kg) and 12 h after (EAH+NAC group). EAH+ASC group part also received NAC (EAH+NAC+ASC group). Control group received only PBS (i.p. and i.v.). Twenty-four hours after Concanavalin A administration, homogenate liver was prepared. Lipoperoxidation was estimated by thiobarbituric acid binding malondialdehyde (MDA). Reduced glutathione (GSH) and oxidized (GSSG) were measured by binding to OPT at pH 8,0 and pH 12,0, respectively. Catalase activity (CAT) and superoxide dismutase (SOD) was determined through H2O2 decomposition and epinephrine autoxidation inhibition, respectively. EAH groups treated with NAC and NAC+ASC there was a reduction of MDA levels, as well as the increase of SOD and GSH/GSSG ratio, compared to HAE group. However, EAH+ASC group parameters were similar EAH and Control groups. CAT activity no showed difference among study groups. Together these results showed that ASC did not promote changes in redox balance parameters evaluated in EAH, however the NAC was able to restore antioxidant reserve.