Análise prospectiva do padrão de metilação nos genes associados a doenças cardíacas SCN5A e MTR para aplicação na genética forense

Abstract

Alterações súbitas ou prolongadas no meio ambiente podem ter influências deletérias na composição do código da vida, o (DNA). A epigenética é a visão moderna da nossa interação com o meio em que vivemos. De acordo com a Organização Mundial de Saúde, “morte súbita” é aquela que acontece até 24 horas desde o início da sintomatologia. A morte súbita de causa cardíaca, definida como uma morte natural inesperada em pessoas sem antecedentes cardiovasculares pré-conhecidos (com carácter fatal) revela-se, em todos os estudos efetuados até o momento, como a principal causa de morte na atividade física, podendo acometer tanto recém-nascidos como adultos. Diversos genes foram identificados em associação a SQTL (síndrome do QT longo – doenças genéticas que causam arritmias cardíacas potencialmente fatais), onde 90% dos casos estão relacionados a mutações no gene responsável pelo canal de sódio SCN5A (locus LQT3) e no gene MTR. A metilação do DNA é uma alteração epigenética que atua na regulação da expressão gênica, e pode estar relacionada com a morte súbita de origem cardíaca. Na metilação do DNA ocorre a adição de um radical metil (CH3) no carbono 5 de citosina geralmente seguida por guanina (dinucleotídeo CpG), catalisada por enzimas DNA metiltransferases (DNMTs). Metodologias relativamente simples permitem o conhecimento da existência de metilação no DNA. O tratamento do DNA genômico com bissulfito de sódio converte as citosinas (C) não metiladas em uracilas (U), mas não afeta as citosinas (C) metiladas, procedendo a seguir à amplificação por PCR específica para metilação e sequenciamento dos produtos selecionados a partir do DNA tratado com bissulfito. Este estudo teve como objetivos investigar diferenças nos padrões de metilação que pudessem estar associados ao desenvolvimento...

Prolonged or sudden changes in the environment may have deleterious influences on the content of the code of life, the (DNA). Epigenetics is the modern view of our interaction with the environment in which we live. According to the World Health Organization, sudden death is that which happens within 24 hours from the onset of symptoms. Sudden death from cardiac causes, defined as an unexpected natural death in people without cardiovascular history foreknown (with fatal character) shows up in all studies performed to date, as the leading cause of death in physical activity can affect both newborns and adults. Several genes have been identified in association with LQTS (long QT syndrome - genetic diseases that cause potentially fatal cardiac arrhythmias), where 90% of cases are related to mutations in the gene responsible for the sodium channel SCN5A (LQT3 locus) and the MTR gene. DNA methylation is an epigenetic modification that acts in the regulation of gene expression, and may be related to sudden cardiac death. DNA methylation occurs on the addition of a methyl group (CH3) carbon-5 of cytosine generally followed by guanine (CpG dinucleotide), enzyme catalyzed DNA methyltransferases (DNMTs). Methodologies allow relatively simple knowledge of the existence of DNA methylation. The treatment of genomic DNA with sodium bisulfite converts cytosine (C) at uracilas unmethylated (U), but does not affect cytosines (C) methylated by making Following amplification by methylation specific PCR and sequencing of the products selected from DNA treated with bisulfite. This study aimed to investigate differences in methylation patterns that could be associated with the development and / or recurrence of cardiovascular diseases. Therefore we assessed the pattern of methylation in the promoter region of genes... (Complete abstract click electronic access below)