Tesis
Peptídeos antimicrobianos da pele de Physalaemus cicada bokermann, 1966 (Anura, Leiuperinae) : identificação, purificação e propriedades
Fecha
2020-02-05Registro en:
BAPTISTA, Gislene Ferreira. Peptídeos antimicrobianos da pele de Physalaemus cicada bokermann, 1966 (Anura, Leiuperinae): identificação, purificação e propriedades. 2019. xv, 47 fl., il. Dissertação (Mestrado em Biologia Animal)—Universidade de Brasília, Brasília, 2019.
Autor
Baptista, Gislene Ferreira
Institución
Resumen
A descoberta dos antibióticos trouxe um grande avanço para a medicina,
melhorando a qualidade de vida e promovendo uma queda drástica da
mortalidade por infecções microbianas. Mas o seu uso indiscriminado tem
conduzido a um processo de retorno à era pré-antibióticos e, mesmo com os
diversos recursos tecnológicos atualmente disponíveis, tem havido dificuldades
em encontrar novos compostos antimicrobianos que possam sanar a problemática
gerada pela resistência dos microrganismos aos antibióticos convencionais.
Os anuros possuem glândulas em sua pele que produzem e secretam uma grande
variedade de compostos bioativos como alcaloides, esteroides, aminas
biogênicas, proteínas e peptídeos. Estas moléculas apresentam uma extensa
gama de bioatividades, incluindo antimicrobiana, antiparisítica, imunomoduladora,
antiviral e antitumoral. Os peptídeos antimicrobianos (PAMs) presentes na
secreção cutânea de anuros têm sido considerados uma opção terapêutica no
desenvolvimento de novos agentes antimicrobianos para combater o fenômeno
de multirresistência aos antibióticos convencionais. Neste trabalho, foi realizada a
purificação e caracterização de quatro novos peptídeos antimicrobianos isolados
da secreção cutânea do anuro Physalaemus cicada, espécie endêmica do Brasil.
A secreção bruta foi obtida por estimulação elétrica moderada e submetida ao
fracionamento por RP-HPLC em coluna C18. As frações eluídas que apresentaram
atividade antimicrobiana no ensaio de varredura foram analisadas por MALDI-TOF
MS (Autoflex II, Brüker). Quatro peptídeos antimicrobianos foram purificados e
suas estruturas primárias foram determinadas por degradação
de Edman: Pc24 (1GFRDNLKKIAKDMLGQIAGAVAEKLKPSQ29),
Pc26.1 (1GFKDFMKNIVGKVVGAVVEKFKPSQ.NH225), Pc26.2
(1GFKDFMKNMAKNLVEKVAGAVIEKLKPSQ.NH229) e Pc28
(GLVSGIANTLSGLLGRL.NH217). Os peptídeos denominados Pc24, Pc26.1 e
Pc26.2 exibiram similaridade significativa com as nattererinas, uma família de
PAMs isolada do sapo Physalaemus nattereri. O peptídeo Pc28 não apresentou
similaridade relevante com nenhuma das famílas de PAMs já descritas. Os PAMs
Pc24 e Pc28 foram produzidos por síntese química e seus efeitos antimicrobianos
foram avaliados sobre bactérias e levedura patogênicas. O peptídeo Pc24
mostrou-se ativo sobre as bactérias Gram-negativas testadas com valor de CMIs
de 4 M para Escherichia coli e de 16 M para Klebsiella pneumoniae. Já o
peptídeo Pc28 exibiu um espectro de ação mais abrangente, mostrando-se ativo
sobre as bactérias E. coli e Staphylococcus epidermdis e sobre a levedura
patogênica Candida albicans. Em conclusão, o presente trabalho resultou na
purificação e caracterização parcial de quatro novos peptídeos antimicrobianos
presentes na secreção da pele de P. cicada, um anuro da família Leptodactylidae,
espécie endêmica do Brasil e com distribuição na região da Caatinga brasileira.
Esses resultados ressaltam a importância de se expandir os estudos acerca do
potencial farmacológico dos anuros da fauna brasileira, englobando espécies de
outros biomas, como a Caatinga.