Artigo de Periódico
Combination of mass cytometry and imaging analysis reveals origin, location, and functional repopulation of liver myeloid cells in mice
Fecha
2016Registro en:
10.1053/j.gastro.2016.08.024
0016-5085
Autor
Bruna Araujodavid
Brenda Naemi Nakagaki
Alan Moreira Araújo
Daniela Silva Dos Reis
Renata Monti Rocha
Pedro Elias Marques
Woo-yong Lee
Justin Deniset
Pei Xiong Liew
Stephen Rubino
Laura Cox
Rafael Machado Rezende
Vanessa Pinho
Thiago Mattar Cunha
Gabriel Rocha Fernandes
André Gustavo Oliveira
Mauro Martins Teixeira
Paul Kubes
Gustavo Batista Menezes
Maísa Mota Antunes
Mônica Morais Santos
Maria Alice Freitas Lopes
Ariane Barros Diniz
Rafaela Vaz Sousa Pereira
Sarah Cozzer Marchesi
Débora Moreira Alvarenga
Institución
Resumen
Histórico e Objetivos
Os macrófagos residentes são derivados de precursores do saco vitelino e semeiam o fígado durante a embriogênese. As células nativas podem ser substituídas por precursores da medula óssea durante lesões extensas, irradiação e infecções. Investigamos as populações hepáticas de células imunes mieloides e sua localização, bem como a dinâmica do repovoamento de fagócitos após a depleção total. Os efeitos na função hepática devido à substituição de fagócitos originais por substitutos derivados da medula óssea também foram examinados.
Métodos
Coletamos e analisamos tecidos hepáticos de C57BL/6 (controle), LysM-EGFP, B6 ACTb-EGFP, CCR2−/−, CD11c-EYFP, CD11c-EYFP-DTR, camundongos sem germes, CX3CR1gfp/gfp, CX3CR1gpf/wt e CX3CR1-DTR-EYFP. Células não parenquimatosas hepáticas foram imunofenotipadas usando citometria de massa e análises de expressão gênica. Kupffer e células dendríticas foram esgotadas de camundongos por administração de clodronato, e sua localização e fenótipo foram examinados usando microscopia intravital e citometria de massa de tempo de voo. Os camundongos receberam gavagem de acetaminofeno ou injeções intravenosas de Escherichia coli marcada com fluorescência, amostras de sangue foram coletadas e analisadas e a função hepática foi avaliada. Avaliamos perfis de citocinas de tecidos hepáticos usando uma matriz multiplexada.
Resultados
Usando citometria de massa e análises de expressão gênica, identificamos 2 populações de macrófagos hepáticos e 2 populações de monócitos. Também identificamos 4 populações de células dendríticas e 1 população de basófilos. Após a depleção seletiva dos fagócitos hepáticos, os precursores mieloides intravasculares começaram a se diferenciar em macrófagos e células dendríticas; as células dendríticas migraram dos sinusóides, após um atraso, através da quimiocina CX3CL1. A distribuição celular voltou ao normal em 2 semanas, mas os fígados repovoados foram incapazes de responder totalmente à lesão induzida por drogas ou bactérias claras por pelo menos 1 mês. Esse defeito foi associado ao aumento dos níveis de citocinas inflamatórias, e a dexametasona acelerou o repovoamento dos fagócitos hepáticos.
Conclusões
Em estudos de depleção de fagócitos hepáticos em camundongos, descobrimos que os precursores mieloides podem se diferenciar em macrófagos hepáticos e células dendríticas, cada uma localizada em compartimentos teciduais distintos. Durante o reabastecimento, os macrófagos adquirem a capacidade de responder adequadamente à lesão hepática e remover bactérias da corrente sanguínea.