Actividad de péptidos antimicrobianos derivados de crotalicidina sobre sistemas modelo y con insaturaciones

Abstract

En este trabajo se estudió un péptido antimicrobiano recientemente descubierto, la crotalicidina, y cuatro derivados propuestos por el grupo de biofísica: ctn1, ctn2, ctn3 y ctn4. Se desarrollaron experimentos de espectrofluorometría, mediciones de concentración mínima inhibitoria y de susceptibilidad en disco, y se tomaron algunas imágenes de microscopía. Los datos recolectados tenían como objetivo evaluar la capacidad antimicrobiana de los diferentes péptidos actuando sobre sistemas modelo compuestos netamente por lípidos saturados y sistemas vivos con insaturaciones. En los sistemas modelo se cuantificó la actividad antimicrobiana como el porcentaje de fuga de calceína, sustancia fluorescente utilizada para las mediciones de espectrofluorometría. En estos mismos sistemas se logró identificar los péptidos con el mayor potencial para ser probados en sistemas vivos: crotalicidina, ctn1 y ctn2. En los sistemas vivos se estudió la hipótesis de que la presencia de insaturaciones en la membrana puede mejorar la resistencia a la acción de los péptidos, por medio de dos cepas de Bacillus Subtilis que permitían tener dos sistemas con diferente grado de insaturación en la membrana. En los sistemas vivos también se cuantificó la actividad antimicrobiana mediante el MIC y con algunas mediciones cualitativas como los halos de inhibición producidos en las mediciones de susceptibilidad por difusión en disco. En estos sistemas se logró identificar el péptido con mayor potencial para continuar en estudio, ctn1, y se encontró que la hipótesis de aumento de resistencia por la presencia de insaturaciones debe ser descartada ya que los experimentos muestran que a menor grado de insaturación la cepa es más resistente.