Trabajo de grado - Pregrado
Nanopartículas de magnetita como vehículo para liberación controlada de fármacos en terapia contra el cáncer de pulmón
Fecha
2019Registro en:
instname:Universidad de los Andes
reponame:Repositorio Institucional Séneca
Autor
Isaza Pierotti, Mary Luz
Institución
Resumen
El cáncer de pulmón es una enfermedad agresiva, y estadísticamente es la mayor causante de muertes asociadas al cáncer. Los tratamientos actuales empleados son fármacos citotóxicos y no específicos, que causan una serie de efectos secundarios indeseados. El objetivo principal de este proyecto consistió en la síntesis de nanopartículas de magnetita, funcionalizadas en superficie con la proteína OmpA como vehículo para el ingreso a las células, en co-formulación con el quimioterapéutico Doxorrubicina (co-inmovilizado superficie), para tratamiento in vitro contra el cáncer de pulmón. En conclusión, fue posible sintetizar nanopartículas de magnetita, obteniendo las características y pureza deseadas. Adicionalmente, se logró la funcionalización de superficie con silanos en un porcentaje menor al deseado. Debido al bajo resultado de la silanización, los pasos consecutivos fueron difíciles de caracterizar. Se espera que un aumento en el porcentaje de silanización, al variar las condiciones experimentales, permita escalar todos los procesos consecutivos. Se logró inmovilizar doxorubicina y OmpA en la superficie de las nanopartículas, comprobado por análisis indirecto. Finalmente, la optimización preliminar del ensayo LDH (sin kit comercial) permitió establecer una densidad celular ideal para en ensayo con la línea A549, donde se propone emplear medios libres de fenol rojo y PBS al 5 %. En lo que respecta a las pruebas de citotoxicidad, se resalta que no se pudieron llevar a cabo, debido a una contaminación desconocida, recurrente en todas las pruebas. Lung cancer is an aggressive disease, and statistically the major cause of cancer-associated deaths. Current treatments are cytotoxic chemotherapeutics, which are non-specific drugs that cause a series of unwanted side effects on patients. The main objective of this project was to synthetize magnetite nanoparticles, functionalized on the surface with OmpA protein as a vehicle for access into the cells, in co-formulation with the chemotherapeutic Doxorubicin (co-immobilized surface), for in vitro treatment against lung cancer cells. In conclusion, it was possible to synthesize magnetite nanoparticles, obtaining the desired characteristics and purity. Additionally, surface functionalization with silanes was achieved, although in a lower percentage than desired. Due to the low result of silanization, consecutive steps were difficult to characterize. It is expected that an increase in the percentage of silanization, by varying experimental conditions, will allow scaling of all consecutive processes. Doxorubicin and OmpA were immobilized on the surface of the nanoparticles, verified by indirect analysis. Finally, the preliminary optimization of LDH assay (without commercial kits) allowed to establish an ideal cell density for testing with the A549 line, where it is proposed the use of media free of red phenol and 5% PBS. Regarding cytotoxicity tests, it is highlighted that they could not be carried out, due to an unknown contamination, recurring in all tests.