Trabajo de grado - Maestría
Sanfilippo Type B disease: A diagnostic approach through enzymatic and molecular analysis in Colombia
Fecha
2021Registro en:
instname:Universidad de los Andes
reponame:Repositorio Institucional Séneca
Autor
Ramírez Borda, Johana Marcela
Institución
Resumen
Glycosaminoglycan metabolism disorders bring together a group of alterations of genetic origin whose effect is the progressive intralysosomal accumulation of GAGs. Affected individuals are compromised in a multisystemic way causing, among other clinical manifestations, coarse facial features, short stature, multiple skeletal dysplasia, joint stiffness, visceromegaly and developmental delay. The diagnostic approach to these disorders represents a challenge in our context since the required biochemical tests are specialized and only performed in major cities. This makes it difficult to have access to affected patients whose geographical location is distant and therefore, the use of samples collected in solid-phase represents an advantage for the study of high-risk populations. The present study aims to report the experience of twenty years of selective screening by assessing enzyme activity in dried blood spots (DBS) collected on filter paper and leukocyte extracts. The deficiency of the enzymes here studied has been associated with Mucopolysaccharidosis I, II, IIIB, IVA, IVB, VI and VII. The present study assessed a population of 8,239 patients referred for clinical suspicion of MPS. Fluorometric endpoint methods using 4-methylumbelliferone-labeled substrates were used. This study allowed us to establish reference values in the Colombian population for ?-L-iduronidase, iduronate 2-sulfatase, ?-N-acetylglucosaminidase, N-acetylglucosamine-6-sulfate sulfatase, ?-galactosidase, arylsulfatase B and ?-glucuronidase, in DBS and leukocytes. In addition, incidence values were calculated for each of MPS. This study offers very useful information for the health system, the scientific community and facilitates the diagnostic definition of these metabolic disorders in the country. Los desórdenes en el metabolismo de los glicosaminoglicanos (GAGs) reúnen un grupo de alteraciones de origen genético cuyo defecto a nivel celular es la acumulación progresiva intralisosomal de GAGs. Los individuos afectados se ven comprometidos en forma multisistémica causando, entre otras manifestaciones clínicas, rasgos faciales toscos, talla corta, displasias esqueléticas múltiples, rigidez articular, visceromegalias y retraso en el desarrollo. La aproximación diagnóstica de estos desórdenes representa un desafío en nuestro contexto dado que los ensayos bioquímicos requeridos son especializados y sólo se realizan en ciudades principales. Lo anterior hace difícil el acceso a pacientes afectados cuya localización geográfica es distante y por lo tanto, el uso de muestras recolectadas en fase sólida representa una ventaja para el estudio en poblaciones de riesgo, donde es necesaria la remisión de un gran número de muestras sin involucrar procesos de refrigeración. El objetivo del presente estudio es comunicar la experiencia de veinte años de tamizaje selectivo, mediante la valoración de la actividad enzimática en gotas de sangre seca recolectada en papel filtro (DBS) y extractos de leucocitos para las enzimas cuya deficiencia ha sido relacionada con Mucopolisacaridosis I, II, IIIB, IVA, IVB, VI y VII. El presente estudió valoró una población de 8,239 pacientes remitidos por sospecha de MPS. Se utilizaron métodos fluorométricos de punto final usando sustratos marcados con 4-metillumbeliferona. Como enzima control, la actividad de beta-galactosidasa fue estimada para todas las muestras analizadas con el fin de garantizar la viabilidad de estas. Los estudios permitieron establecer valores de referencia en población Colombiana para alpha-iduronidase, Iduronate 2-sulfatase, alpha-N-acetylglucosaminidase, N-acetylglucosamine-6-sulfate sulfatase, Beta-galactosidase, Arylsulfatase B y Beta-glucuronidase, en DBS y leucocitos. Además, se calcularon valores de incidencia para