Tesis de licenciatura
Clonación y secuenciación de una proteína hipotética coiled-coil de Azospirillum sp. B510
Fecha
2015-05Autor
Flores Flores, César Adrián
Resumen
"Las bacterias tienen un citoesqueleto (CSK) multifuncional constituido por
proteínas homólogas y no homólogas a las proteínas que forman el CSK
eucariótico; ambas están implicadas en funciones principales, tales como
morfogénesis, división celular, partición de DNA (ácido desoxirribonucleico) y
movilidad. Un tipo de proteínas homólogas son las proteínas semejantes a
filamentos intermedios (FIs), caracterizados por contener estructuras coiled-coil,
tal como la proteína crescentina (CreS) de Caulobacter crescentus implicada en el
desarrollo de su curvatura morfológica.
Se seleccionó una proteína con estructura hipotética coiled-coil de la cepa
Azospirillum sp. B510 para clonar y secuenciar su gen en Escherichia coli y
conocer posteriormente si esta proteína es del tipo FIs y la función que
desempeña. Se diseñaron los cebadores fuera del marco de lectura del gen de la
proteína hipotética coiled-coil establecido en el banco genómico de Azospirillum
sp. B510, se amplificó el fragmento de DNA mediante PCR (reacción en cadena
de la polimerasa) y se ligó al sistema de clonación pCR 2.1-TOPO TA. La
secuencia del gen tuvo 97% de identidad con el DNA de la proteína coiled-coil
hipotética del banco de Azospirillum sp. B510."