Diseño de un método de cultivo de organoides de miocardio derivados de células madre adultas

Abstract

Los organoides son cultivos 3D desarrollados a partir de células madre creando un ambiente artificial propicio, en el cual las células pueden crecer e interactuar en un entorno tridimensional similar a las condiciones de un estado in vivo, imitando su funcionamiento molecular y celular lo cual permite tener un resultado en investigación de enfermedades y fármacos muy preciso. Para obtener un organoidese deben cultivar células madre en un medio favorable que permita su crecimiento y desarrollo. El propósito de esta investigación fue realizar el diseño de un método de cultivo que permita un adecuado entorno de crecimiento para el desarrollo de organoides de miocardio a partir de un cultivo de células madre mesenquimales (MSCs). Las células MSCs primero pasaron por un proceso de diferenciación acélulas endoteliales y cardiomiocitos que tarda entre 15 y 21 días respectivamente y posteriormente fueron utilizadas junto con hidrogel compuesto de colágeno como medio de cultivo para el desarrollo del organoides de miocardio. Los protocolos implementados para la gelificación del hidrogel fueron evaluados mediante la viabilidad celular del organoide al pasar 7 y 15 días de incubación, donde se realizó la observación de componentes de células vivas con pruebas de tinción supravital.

Organoids are 3D cultures developed from stem cells, creating a favorable artificial environment in which cells can grow and interact in a three-dimensional environment similar to the conditions of an in vivo state, mimicking their molecular and cellular functioning, which allows for more accurate results in disease and drug research. To obtain an organoid, stem cells must be cultured in a favorable environment that allows their growth and development. The purpose of this research was to design a culture method that allows a suitable growth environment for the development of myocardial organoids from a culture of mesenchymal stem cells (MSCs). MSCs cells first undergo a differentiation process to endothelial cells and cardiomyocytes that can range from 15 to 21 days respectively, which are subsequently used together with collagen composite hydrogel as the culture medium for myocardial organoid development. The protocols implemented for the gelation of the hydrogel were evaluated by the cell viability of the organoid after 7 and 15 days of incubation, where the observation of live cell components was performed with supravital cell staining.