Otro
Evaluación de la infectividad de rotavirus (ECwt) en vellosidades intestinales de ratones adultos ICR, tratados con inhibidores de NF-kB.
Autor
Cely Rodríguez, Wilder Lisandro
Institución
Resumen
Los rotavirus causan gastroenteritis aguda con gran impacto en la morbilidad y mortalidad
de la población infantil. La estrategia terapéutica a nivel mundial utilizada hasta el momento
es la vacunación, pero no asegura que los síntomas desaparezcan completamente. Por tal
razón, en el Laboratorio de Biología Molecular de Virus de la Universidad Nacional de
Colombia se investiga sobre las interacciones del rotavirus y la célula huésped, evaluando
con fármacos la modulación de moléculas celulares como ROS, NF-kB, PPARγ y COX-2
entre otras, como promisorio mecanismo de mitigación de la infección. Por consiguiente, en
este trabajo se evaluó la infección por rotavirus (ECwt) en vellosidades intestinales aisladas
de ratón ICR tratadas con inhibidores específicos de NF-kB como curcumina, dietilcarbamato
y dietil-maleato, analizando la variación en la expresión de está y la infección
por técnicas de ELISA, inmunofluorescencia y Western Blotting. Se encontró que la
expresión de la proteína NF-kB medida en intensidad media de fluorescencia y los
antígenos virales, incrementaban con la infección, pero al tratar con los inhibidores la
expresión de la proteína disminuye al igual que los porcentajes de absorbancia del antígeno
viral. Las vellosidades aisladas de ratón ICR al ser inoculadas in vitro con el rotavirus ECwt,
incrementan la expresión de la proteína NF-kB y de proteínas relacionadas en las vías proinflamatorias,
tales como PPARγ y COX-2 además de los niveles de ROS. Por otro lado, el
uso de inhibidores de NF-kB tales como curcumina, dietil-carbamato y dietil-maleato
disminuyen la expresión de estas proteínas, como también los niveles de ROS y reduce la
producción de antígenos virales. Rotaviruses cause acute gastroenteritis with great impact on the morbidity and mortality of
children. The worldwide therapeutic strategy used so far is vaccination, but it does not
ensure that the symptoms disappear completely. For such a motive in the Laboratory of
Molecular Biology of Virus of the National University of Colombia is investigating between
interactions of the rotavirus and the host cell, evaluating the modulation of cellular molecules
with reagents such as ROS, NF-kB, PPARγ and COX-2 among others, as a promising
mechanism to mitigate the infection. Therefore, the aim of this work was evaluate rotavirus
(ECwt) infection on in vitro model system consisting of intestinal villi isolated from ICR adult
mice, infected with ECwt and treated with specific NF-kB inhibitors such as curcumin,
Diethyldithiocarbamate and diethyl maleate, analyzing the variation in NF-kB expression and
rotavirus infection by ELISA, immunofluorescence and Western Blotting techniques. We
found that NF-kB protein expression measured in mean fluorescence intensity and viral
antigens to increase with infection, but when intestinal villi isolated - infected with rotavirus
were treated with inhibitors, the protein expression decreases as did the percentages of viral
antigen absorbance. The isolated villi of mouse ICR when inoculated in vitro with the ECwt
rotavirus, increase the expression of NF-kB protein and related proteins in pro-inflammatory
pathways, such as PPARγ and COX-2 in addition increase to ROS levels. In addition, the
use of NF-kB inhibitors such as curcumin, diethyl-carbamate and diethyl-maleate decrease
the expression of these proteins, as well as ROS levels and reduce viral antigen production.
On the other hand, the use of NF-kB inhibitors such as curcumin, diethyl carbamate and
diethyl maleate decrease the expression of these proteins, as well as ROS levels and reduce
the production of viral antigens.