Tesis
Efecto de la activación β-adrenérgica en ovario de rata durante el período de subfertilidad
Fecha
2015Autor
Vega Villarroel, Carolina Alejandra
Institución
Resumen
La postergación de la maternidad hacia el periodo de subfertilidad es un tema de
salud pública relevante, los mecanismos que operan en esta etapa reproductiva no
han sido descritos. Evidencias de nuestro laboratorio, obtenidas en ratas Sprague
Dawley, indican que la actividad nerviosa simpática aumenta espontáneamente
durante el periodo de subfertilidad, lo que conduce a la formación y/o mantención de
quistes foliculares, contribuyendo al cese de la función ovárica. El aumento del tono
adrenérgico en ovario de rata durante el periodo óptimo de fertilidad (3-7 meses de
edad) altera el desarrollo folicular y podría conducir a la formación y mantención de
quistes foliculares, lo que podría acelerar el envejecimiento reproductivo. Para
estudiar esta posibilidad, se postula la hipótesis que la “La activación β-adrenérgica
inducida por la administración de Isoproterenol produce un adelanto del
envejecimiento ovárico de la rata durante el periodo de subfertilidad”. Para
desarrollar esta hipótesis se plantea el objetivo general: Estudiar el efecto del
aumento de la actividad ß-adrenérgica en el desarrollo folicular ovárico de rata
durante el período de fertilidad y subfertilidad. Para ello, se utilizaron ratas Sprague
Dawley de 6, 8 y 10 meses de edad. Se simuló un tono adrenérgico aumentado
mediante la administración vía subcutánea de Isoproterenol, un agonista β adrenérgico. Los animales fueron eutanasiados a los 20 días post-inyección; los
ovarios izquierdos fueron fijados en bouins y teñidos con hematoxilina-eosina para el
análisis morfológico, se colectó suero para la determinación de las hormonas
esteroidales y Antimülleriana por enzimo inmuno ensayo. La noradrenalina y el 3- metoxi-4-hidroxifenilglicol se midieron por cromatografía líquida de alto rendimiento.
En animales controles que ingresan a la etapa de subfertilidad, se observó una
disminución en el contenido de hormonas esteroidales séricas (progesterona,
androstenediona, y estradiol), hormona antimülleriana, y ciclos estrales. El análisis
morfológico mostró en este grupo de animales, un aumento de las estructuras
atrésicas y quísticas, indicando el deterioro de la función ovárica en esta etapa. La
administración de Isoproterenol para activar la vía β-adrenérgica en ratas tuvo
diferentes efectos dependiendo del periodo reproductivo. En ratas fértiles de 6 meses
de edad se observó un aumento en la atresia de folículos preantrales, antrales, y
folículos tipo III. Estos resultados coinciden con una disminución de las hormonas
esteroidales como progesterona, androstenediona y estradiol, y número de cuerpos
lúteos. Durante el inicio del periodo de subfertilidad en ratas de 8 meses de edad no
fue posible observar cambios significativos inducidos por la activación β adrenérgicas. Mientras que en ratas en periodo sub-fértil de 10 meses de edad, se
observó que un aumento de folículos secundarios sanos, aumento de los niveles
séricos de las hormonas anti-Mülleriana y androstenediona, aumento en la cantidad
de folículos tipo III. Sin embargo, se observó una menor cantidad de quistes
foliculares y un aumento en la cantidad de cuerpos lúteos. En conclusión, el presente
trabajo sugiere que la sobre-estimulación β-adrenérgica afecta la función ovárica,
sugiriendo un adelanto del envejecimiento ovárico en ratas fértiles y contrario a lo
propuesto, se observó un grado de mejoramiento de la función ovárica en ratas en
periodo sub-fértil, ambos resultados apoyan la idea que el SNS tiene un rol
importante en la función ovárica. The postponement of motherhood to the period of subfertility is an important public
health theme; the mechanisms involved in this reproductive period have not been
described. Evidence from our laboratory, obtained in Sprague Dawley rats indicate
that sympathetic nerve activity increases spontaneously during the period of
subfertility, facilitating the formation and / or maintenance of follicular cysts,
contributing to the cessation of ovarian function. The increased adrenergic tone in rat
ovary during the optimum period of fertility (3-7 months old) alters follicular
development and could allow the formation and maintenance of follicular cysts and
could accelerate reproductive aging. To study this possibility, the hypothesis
postulated is "The β-adrenergic activation by Isoproterenol produced an acceleration
of rat ovarian aging during the subfertility period." To test this hypothesis, the
following objective was proposed: To study the effect of increased ß-adrenergic
activity on rat ovarian follicular development during the fertility and subfertility period.
For this, Sprague-Dawley rats of 6, 8 and 10 months old were used. In our animals’
model, Adrenergic tone enhanced was simulated by Isoproterenol administration, a β adrenergic agonist. Animals were euthanized at 20 days post-injection; To
morphological analysis, the left ovaries were fixed in Bouins and stained with
hematoxylin-eosin. To determinate steroid and anti-Müllerian hormone by enzyme
immunoassay, of serum was collected. Noradrenaline and 3-methoxy-4-
hydroxyphenylglycol was measured by high performance liquid chromatography. In control animals that initiate the stage of subfertility, it was observed a decrease in
both, the serum steroid hormones (progesterone, androstenedione, and estradiol),
and AMH content, accompanied of estrous cyclicity loss. The morphological analysis
showed an increased in atretic and cystic structures, suggesting impairment of
ovarian function at this stage. Isoproterenol administration to activate the β adrenergic pathway in rats had different effects depending on the reproductive period.
In 6 months old rats was observed an increase in both preantral and antral follicular
atresia, and also an increase number of type-III follicles. In this animal group, the
result showed a decreased in steroid hormones such as progesterone,
androstenedione and estradiol, and number of corpora lutea. In rats 8 months old was
not possible to observe significant changes. While that 10 months old rat was
observed an increased secondary follicles number, serum levels of the AMH and
androstenedione hormones, also presented an increased amount of type-III follicles.
However, a smaller amount of follicular cysts and an increase in the number of
corpora lutea was observed. In conclusion, the present work suggests that over stimulation β-adrenergic affects ovarian function, suggesting an accelerate of ovarian
aging in fertile period and contrary to thought, a degree of improvement of ovarian
function in rats in subfertile period was observed, both results support the idea that
the sympathetic nerves system has an important role in ovarian function.