En la presente investigación se estudió cuali y cuantitativamente el semen del puye (Galaxias maculatus). Para ello se capturaron especímenes adultos (6,24 IT 0,84 cm de longitud estándar) de aguas límnicas del Sur de Chile y luego fueron mantenidos en cautiverio. Una vez maduros, diez especímenes fueron anestesiados y mediante masaje abdominal se les extrajo una muestra de semen que se sometió a examen visual, recuento espermático, espermatocrito y motilidad. Los resultados obtenidos muestran que el semen del puye es poco abundante (máximo 0,2 m1 por individuo), de color blanquecino y gran viscosidad. Cuantitativamente se encontró un promedio de 55,3 x lo6 espermatozoides/ml, un espermatocrito de 89,63 % y una correlación entre ambas variables de r=0,97. La motilidad frente a distintos activadores es muy baja y sólo se observó una motilidad igual a 2 (en una escala de O a 5) por aproximadamente 30 min al utilizar un activador en base a carbamida.