APLICAÇÃO da Técnica de Hrm na Identificação de Espécies de Moscas (diptera, Calliphoridae) de Importância Forense

Abstract

A entomologia forense consiste no estudo de insetos e outros artrópodes na solução de procedimentos relacionados à área criminal. A maioria das evidências entomológicas é fortemente dependente da identificação precisa das espécies. Devido a problemas com base na identificação morfológica, novos métodos foram desenvolvidos, incluindo métodos moleculares como DNA Barcode. O objetivo deste trabalho foi identificar seis espécies de moscas varejeiras de importância forense para o Brasil. Para isso, foi utilizada a técnica de análise High Resolution Melting (HRM). 44 amostras das espécies Chrysomya albiceps, Chrysomya megacephala, Chrysomya putoria, Cochliomyia macellaria, Lucilia cuprina e Lucilia eximia foram sequenciadas usando o gene citocromo c oxidase subunidade I (COI), das quais 70% das amostras foram identificadas. Três pares de primers foram desenhados do gene COI para amplificação de fragmentos com tamanhos de 124, 82 e 123 pb, em regiões com polimorfismos necessários para a análise por HRM. O protocolo de amplificação por HRM permitiu diferenciar as seis espécies de moscas utilizando uma combinação dos amplicons de 82 e 124 pb, sendo eficaz na identificação de espécies de moscas da família Calliphoridae de interesse forense para o Brasil e demonstrou ser uma ferramenta alternativa ao sequenciamento de DNA.