Efeitos do óxido nítrico sobre a atividade sinalizadora de Src quinase associada à migração de linhagens celulares que expressam ou não a proteína tirosina fosfatase alfa (PTPalfa)

Abstract

A Proteína Tirosina Fosfatase do tipo receptor (PTP) desempenha funções reguladoras do metabolismo, migração, sobrevivência, proliferação e a diferenciação celular (Hunter, 2000; Tonks, 2001). Esses processos estão associados com alterações nos padrões de adesão das células envolvidas, e com alterações nos níveis de fosforilação em tirosina da proteína tirosina Src quinase. Esta regulação acontece através da desfosforilação do resíduo Tyr527 de Src e da fosforilação do resíduo Tyr416 e conseqüente ativação da enzima. Nesse estudo demonstramos que o óxido nítrico (NO) radical livre sinalizador, ativa Src quinase de duas maneiras e que estas duas formas de ativação acontecem na dependência da expressão da PTP: a) O NO estimula a fosforilação do resíduo Tyr789 da PTP que se torna ativa e promove a desfosforilação do resíduo pTyr527 de Src quinase resultando em ativação da quinase. b) O NO promove a nitrosilação de Src quinase e esta modificação pós-tradução de natureza redox parece promover a fosforilação do resíduo Tyr 416 de Src quinase, nas células ausentes de expressão de PTP. Esta ativação apresentou uma dependência direta do ambiente redox intracelular. Eventos fisiológicos como a migração celular são acompanhados pela elevação de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio, desencadeando o recrutamento do complexo Src-Fak. Nesse contexto, apresentamos a PTP como a proteína reguladora dos processos redox, que envolvem as reações de fosforilação e nitrosilação de Src quinase. A expressão da PTP apresentou uma relação inversa com os níveis de expressão da isoforma induzível da NO sintase e com as concentrações de NO. Estes eventos irão determinar vias de sinalização associadas aos processos de proliferação, parada de crescimento e direcionar as vias de ativação associadas à migração-celular.