EFEITO ADJUVANTE DA Propionibacterium acnes E DE SEU COMPONENTE POLISSACARÍDICO SOLÚVEL PURIFICADO SOBRE A MIGRAÇÃO E ATIVIDADE CITOTÓXICA DE CÉLULAS DO EXSUDATO PERITONEAL DE CAMUNDONGOS C57Bl/6

Abstract

In the present work we analyzed the effect of heat-killed-Propionibacterium acnes or its purified soluble polysaccharide (PS) injected by intraperitoneal route in C57Bl/6 mice on peritoneal exudate cells (PEC), aiming at their distribution and cytotoxicity. Both treatments induced an increase in macrophages, immature dendritic, and NKT cells. The bacterium caused a strong increase in the NK1.1+CD3+CD4-CD8- subpopulation and a decrease of B1a lymphocytes, while PS induced an increase in the NK1.1CD3+CD8+ subpopulation and a marked increase of B1a cells in the peritoneal cavity. To verify P. acnes and PS adjuvant effect on PEC cytotoxic properties we evaluated in vitro their effect on murine B16F10 melanoma cells. The effector cells from the bacteria and PS-treated groups lysed melanoma cells in co-cultures with PEC. The cytotoxicity seemed to be related to NO production, since it was completely abrogated in PEC from iNOS-/- mice. Cytotoxicity from P. acnes-treated mice also depended on IFN- and TNF- since lysis decreased with PEC from IFN- knockout mice or by adding anti-TNF- to the co-cultures. Tumoricidal activity in PEC from P. acnes-treated group is mediated by macrophages and NKT; this activity in PEC from PS-treated mice is played only by macrophages. Both treatments also increased IL-4 and IFN- synthesis by NKT cells. We show that P. acnes act mainly in recruiting and activating NKT cells in PEC, which also play an important tumoricidal activity independent of IFN- . An important mechanism that mediated bacterial effects is the NO release that seems to be predominantly stimulated by the polysaccharide present in the bacterial cell wall.

Neste trabalho, analisamos o efeito modulador da Propionibacterium acnes (P. acnes) morta pelo calor e de seu componente polissacarídico solúvel purificado (PS) sobre células do exsudato peritoneal de camundongos C57Bl/6 tratados intraperitonealmente. Tanto a bactéria como o PS aumentaram o número de macrófagos, células dendríticas e linfócitos NKT para a cavidade peritoneal dos animais. A P. acnes aumentou principalmente o número de linfócitos NKT CD3+CD4-CD8-, e em menor grau a subpopulação CD3+CD8+, sendo o componente polissacarídico responsável pelo aumento desta última subpopulação. Células dendríticas do exsudato peritoneal de animais tratados com P. acnes, sem receber nenhum estímulo in vitro diferenciarem-se mais precocemente em células dendríticas maduras. Analisamos também o efeito da P. acnes ou de seu componente polissacarídico purificado sobre a função citotóxica in vitro de macrófagos e linfócitos NKT. Macrófagos obtidos de animais tratados tanto com a bactéria, como com seu componente polissacarídico foram citotóxicos para células de melanoma (B16F10) em co-cultura. Esta atividade foi mediada principalmente pela produção de NO, uma vez que a ausência deste fator praticamente aboliu tal função. Além do NO, a citotoxicidade mediada por macrófagos obtidos dos animais tratados somente com a bactéria também tem a participação de TNF- e IFN-. Somente os linfócitos NKT obtidos dos animais tratados com P. acnes foram citotóxicos para células de melanoma murino, após serem estimulados in vitro com IL-12, sendo esta função independente de IFN-. O estímulo intraperitoneal com P. acnes, dependente principalmente do seu componente polissacarídico, modula a função de células da resposta imune inata responsáveis por induzir uma resposta imune adaptativa eficaz e protetora.