Tesis
Análisis de la expresión de genes de defensa VSP2, LOX2, PR1 y PDF1.2 en arabidopsis thaliana (l) heynh, frente a diferentes concentraciones de calcio
Fecha
2017Registro en:
Gutiérrez Ramírez, D. (2017). Análisis de la expresión de genes de defensa vsp2, lox2, pr1 y pdf1.2 en arabidopsis thaliana (l) heynh, frente a diferentes concentraciones de calcio (Tesis de pregrado). Universidad de las Américas, Quito.
UDLA-EC-TIB-2017-06
Autor
Gutiérrez Ramírez, Daniela
Institución
Resumen
La respuesta de defensa de las plantas frente a patógenos ocurre cuando se inicia el reconocimiento de moléculas efectoras de los patógenos, necrotróficos o biotróficos. Esto influye en la activación de la defensa de las plantas sea esta basal la cual es mediada por la PAMP o resistencia sistémica adquirida (SAR) que da a la planta una protección debido a una infección secundaria que esta ha sufrido. Arabidopsis thaliana es una planta modelo muy utilizada en técnicas moleculares. En el presente trabajo se analizaron los genes de defensa de las que influyen en las rutas del SA (PR1) y JA (LOX2, VSP2 y PDF1.2), para ello se cultivaron plantas de Arabidopsis thaliana ecotipo Col-0, con medio nutritivo Hoagland por siete semanas. Posteriormente se realizó un lavado con agua destilada por una semana y se les suministro los diferentes medios nutritivas (Murashigue & Skoog y Hoagland) con diferentes tratamientos (agua destilada, medio optimo, medio optimo sin calcio (-Ca), medio optimo con exceso de calcio (+Ca 5X). Se utilizaron 5 plantas de Arabidopsis para cada tratamiento, se recolectaron las plantas 24 horas y siete días después de aplicadas los tratamientos y se extrajo el RNA de toda la planta, se eliminó el DNA contaminante con la enzima Dnasa y el RNA se usó como molde para la síntesis de cDNA, posteriormente se usó como templado para la qPCR en tiempo real. El análisis de expresión génica se realizó aplicando el método de Livak. Se pudo determinar que los medios nutritivos MS y Hoagland inducen las rutas de defensa del SA y JA a las 24 horas de aplicada la dieta, pero siete días después existe un antagonismo entre los genes LOX2 y PR1 con los dos medios nutritivos. En el tratamiento con medio nutritivo MS (exceso de calcio), tuvo una mayor expresión en los genes LOX2 y PDF1.2 dependientes de la ruta del JA. Una deficiencia de calcio influye en la supresión de los genes de defensa. Finalmente se escogió la dieta MS para suministrarla al mutante coi1-21 el cual dio resultados favorables ya que se inhibió los genes de respuesta de la ruta de JA y se elevó el gen PR1 el cual es dependiente de la SAR.