Tesis
Análisis de la expresión relativa y caracterización del gen que codifica para HSP70 en plántulas de vasconcellea pubescens sometidas a estrés térmico
Fecha
2018Registro en:
Cevallos Vilatuña, T. Y. (2018). Análisis de la expresión relativa y caracterización del gen que codifica para hsp70 en plántulas de vasconcellea pubescens sometidas a estrés térmico (Tesis de pregrado). Universidad de las Américas, Quito.
UDLA-EC-TIB-2018-38
Autor
Cevallos Vilatuña, Tiffany Yiselle
Institución
Resumen
Únicamente el 3.5 por ciento del área de la tierra global no está afectada por algún tipo de factor ambiental. El estrés abiótico impacta de forma significativa al crecimiento y desarrollo de las plantas. El aumento de la temperatura debido al calentamiento global tiene implicaciones negativas sobre los sistemas mundiales de producción de cultivos. Sin embargo, las plantas son organismos complejos capaces de desarrollar tolerancia ante diferentes factores de estrés. Teniendo en cuenta el interés creciente ante esta problemática y su impacto negativo en el rendimiento de los cultivos surge la necesidad de encontrar herramientas biotecnológicas que permitan ofrecer una solución. Se realizó el presente trabajo para analizar la expresión relativa y caracterizar el gen que codifica para Hsp70 en plántulas de Vasconcellea pubescens sometidas a estrés térmico. En primer lugar, se sembró semillas de V. pubescens hasta que alcanzaron un tamaño adecuado para el ensayo. De las plantas sembradas, 64 plántulas repartidas en dos repeticiones biológicas se sometieron a 25 grados centígrados, como temperatura control, y a 45 grados centígrados y 55 grados centígrados como temperaturas de estrés, durante 4 horas. El análisis de varianza (ANOVA), mostró significancia para los 2 de los 3 tipos de pruebas bioquímicas empleadas (fuga de electrolitos, actividad de la enzima catalasa y contenido de prolina). Todas las pruebas indicaron una respuesta termotolerante ante el ensayo de estrés térmico con temperaturas, consideradas extremas. A partir de los productos de RT-PCR obtenidos y el análisis de gel, se observó que existe mayor expresión del gen HSP70 a medida que se incrementa la temperatura. De esta forma, se logró comprobar que el gen HSP70 respondió en V. pubescens de igual manera que lo reportado para otras especies de plantas, y que, por lo tanto, este gen se sobre expresó en condiciones de estrés para otorgarle a la planta tolerancia ante la temperatura. Finalmente, el análisis bioinformático se realizó con el objetivo de proporcionar por primera vez una secuencia parcial de HSP70, así como su historia evolutiva en V. pubescens, una planta subutilizada, que podría presentar genes de interés que las plantas comerciales han perdido por efecto de la domesticación.