In order to evaluate if temporary manipulation of digitized images acquired in the JPEG format affects its optic density, 26 periapical radiographies were digitized, stored in the JPEG 12 format and digitally reproduced three times. One of the sets did not suffer any alteration and was called JPEGd. The others had their image imported to the Adobe Photoshop program and were submitted to one or two alterations, which were undone and saved, constituting the JPEG1a and the JPEG2a groups, respectively. The program ImageLab was used for the digital subtraction of the following pairs of images: JPEG x JPEGd, JPEG x JPEG1a and JPEG x JPEG2a. The average density values were obtained, as well as the standard deviation of each image. In all of them the average value was 128, however some variability observed in the standard deviation. The average standard deviation (0.50, 1.47 and 1.50, for JPEGd, JPEG1a and JPEG2a, respectively) of each group were submitted to the Variance Analysis complemented by the Multiple Comparison Dunnet T3 Test. Significant differences were found in the standard deviation values among the JPEG x JPEGd and JPEG x JPEG1a/JPEG x JPEG2a. We conclude that the JPEG file manipulation does not interfere in the average value of optic density, however it takes to the increasing of the standard deviation, a fact that can influence studies of this nature.Para avaliar se a manipulação temporária de imagens digitais armazenadas no formato JPEG altera a sua densidade óptica, 26 radiografias periapicais de arquivo foram digitalizadas através de scanner, armazenadas no formato JPEG 12 e digitalmente reproduzidas três vezes. Um dos conjuntos não sofreu alterações e foi denominado JPEGd. Nos demais, as imagens foram importadas para o programa Adobe Photoshop e submetidas a uma ou duas alterações, as quais foram desfeitas, sendo salvas, constituindo os conjuntos JPEG1a e JPEG2a, respectivamente. O programa ImageLab foi utilizado para a subtração digital dos seguintes pares de imagens: JPEG x JPEGd; JPEG x JPEG1a e JPEG x JPEG2a. Foram obtidos os valores médios de densidade óptica, bem como o desvio-padrão de cada imagem. Em todas elas o valor médio foi 128, contudo observou-se variabilidade quanto ao desvio-padrão. Os desvios-padrão médios (0,50, 1,47 e 1,50, para JPEGd, JPEG1a e JPEG2a, respectivamente) de cada grupo foram submetidos à Análise de Variância, utilizando o delineamento em blocos casualizados, complementada pelo Teste de Comparações Múltiplas Dunnet T3. Foram encontradas diferenças significativas nos valores de desvio-padrão entre os grupos JPEG x JPEGd e JPEG x JPEG1a/JPEG x JPEG2a. Conclui-se que a manipulação de arquivos JPEG não interfere no valor médio de densidade óptica, contudo leva ao aumento do seu desvio-padrão, o que pode interferir nos estudos dessa natureza.