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Fecundación in vitro y sus efectos sobre la tasa de división y desarrollo embrionario en ovocitos de cordera, con y sin células del cúmulus: estudio Comparativo del uso de la albúmina sérica bovina y el suero de oveja en los medios de capacitación
Effect of in vitro fecundation of prepubertal sheep oocytes with or without cumulus cells on cleavage and embryo development rate: a comparative study of bovine serum albumin and sheep serum added to the capacitation media
Registro en:
0798-2259
199102ZU46
Autor
Cano Torres, Rafael
Gil Huerta, Lidya
González Ortí, Noelia
Martínez Asensio, Felisa
Malo Ladrero, Clara
Pinto Mualuzanga, Daniel
Institución
Resumen
El objetivo de este estudio fue evaluar la albúmina sérica bovina (ASB) y el suero de oveja (SO), en los medios de capacitación seminal, en función de la
tasa de división y desarrollo embrionario de ovocitos de corderas, madurados in vitro con (COCs) y sin células del cúmulus (ODs). El medio base de
capacitación fue el fluido oviductal sintético con 2,38 mg/mL Hepes y 25 μg/mL Gentamicina, suplementado con 4 mg/mL ASB o 20% (v/v) SO. La fecundación se
realizó con 1x106 espermatozoides/ mL, seleccionados mediante un gradiente por movimiento a la superficie. Las tasas de división y desarrollo embrionario
fueron evaluadas a 48 y 168 hrs. post inseminación, no encontrándose diferencias estadísticas en función de los medios de capacitación (ASB vs SO): 21,5 vs
24,3% para COCs y 10,8 vs 8,0% para ODs si se trata de división, y en caso de desarrollo 16,7 vs 16,6% para COCs y 2,1 vs 8,8% para ODs. Sin embargo,
considerando la presencia o ausencia de células del cúmulus en el ovocito, hubo diferencias altamente significativas (P<0,001) a favor de los COCs, quienes
a su vez obtuvieron mejores resultados de maduración que los ODs: 69,5 vs 31,1%, respectivamente (P<0,001). Estos resultados confirman que la ASB y el SO
son buenos agentes de capacitación para los protocolos de producción in vitro de embriones. Por otro lado se confirmó que, con la eliminación de
las células del cúmulus previo a la maduración, ésta se reduce significativamente, lo mismo que las tasas de división y desarrollo embrionario. Sin embargo,
puesto que parte de estos ovocitos consiguen desarrollarse a mórulas y blastocistos podrían ser utilizados en combinación con las nuevas técnicas
reproductivas en clonación, producción de células madre, entre otras. 145-151 kno249@hotmail.com lydiagil@unizar.es Bimestral The aim of this work was to study the effect of Bovine Serum Albumin (BSA) and Sheep Serum (SS) on seminal capacitation medium in accordance with division
rate and embryo development of female lamb in vitro maturated oocytes with (COCs) or without cumulus cells (ODs). The capacitation medium was synthetic
oviductal fluid (SOF) supplemented with 2.38 mg/mL Hepes and 25 μg/mL Gentamicyne, with either 4 mg/mL BSA or 20% (v/v) SS. Sperms used for fecundation were
isolated by swim up, with 1 x 106 sperms/mL concentration. Cleavage rate and embryo development were observed at 48 and 168 h post insemination, no finding
any significant influence of the capacitation medium tested (BSA vs SS): 21.5 vs 24.3% for COCs and 10.8 vs 8% for ODs on cleavage rate, or on development
16.7 vs 16.6% for COCs and 2.1 vs 8.8% for ODs. Nevertheless, the oocyte type significantly influenced (P<0,001) the maturation rate, COCs oocytes got
better maturation rates than ODs; 69.5 vs 31.1%, respectively. These results confirm that both BSA and SS are good capacitation agents for in vitro embryo
production protocols. On the other side, it confirmed that removal of cumulus cells prior in vitro maturation reduces maturation, cleavage and embryo
development rates. However, a part of these oocytes get develop to the morula stage, so it can´t be reject to be used in combination with new reproductive
techniques.