Influencia de la composición lipídica de modelos de membrana en la incorporación de péptidos penetrantes de células

Abstract

Los péptidos penetrantes de células pueden ser utilizados en diversas aplicaciones terapéuticas. Éstos son ampliamente utilizados para promover el ingreso al interior de la célula de moléculas conjugadas. En la actualidad se conocen una serie de péptidos penetrantes de células de alta eficiencia, de los cuales se han propuesto variados mecanismos de incorporación a la célula (formación de micela inversa, la formación de poro listón de barril y toroidal y el modelo “como alfombra”). Una de las variables poco estudiadas y no descritas sobre el mecanismo de incorporación de estos péptidos es la dependencia con la composición lipídica y/o con las propiedades fisicoquímicas de la membrana. El principal problema del uso de los péptidos penetrantes de células conjugados a fármacos es la poca selectividad a la célula blanco, debido a esto es necesario estudiar si estos péptidos ingresan de forma diferencial a células que presentan ciertas modificaciones lipídicas como, por ejemplo, un cambio en la concentración de colesterol presente en las células. Para esto se estudió el efecto de colesterol en la incorporación de los péptidos penetrantes de células y en las propiedades fisicoquímicas de la membrana. Las propiedades fisicoquímicas de los modelos de membrana se estudiaron a través de los ensayos de anisotropía de DPH, polarización generalizada de Laurdan y sus respectivas medidas de tiempo de vida. Los péptidos penetrantes de células utilizados son R6H4, TAT, Penetratina, ARF 1-22, FGF, pKCi, R9, pVEC, Bac7 y melitina; cuyos mecanismos de incorporación directa a la membrana están tratados en la literatura.

Penetrating cell peptides can be used in various therapeutic applications. These are widely used to promote the entry into the cell of conjugated molecules. At present, a series of penetrating peptides of high efficiency cells are known, of which various mechanisms of incorporation to the cell have been proposed (reverse micelle, barrel and toroidal pore, and like carpet). "). One of the variables poor studied and not described on the mechanism of incorporation of these peptides is the dependence with the lipid composition and / or with the physicochemical properties of the membrane. The principal problem of the use of penetrating peptides of cells conjugated to drugs is the low selectivity to the target cell, due to this it is necessary to study if these peptides enter differentially to cells that present certain lipid modifications, for example, a change in the concentration of cholesterol present in the cells. For this, the effect of cholesterol on the incorporation of cell penetrating peptides and on the physicochemical properties of the membrane was studied. The physicochemical properties of the membrane models were studied through DPH anisotropy assays, laurdan generalized polarization and lifetime measurements. The cell penetrating peptides used are R6H4, TAT, Penetratin, ARF 1-22, FGF, pKCi, R9, pVEC, Bac7 and melitin; whose mechanisms of direct incorporation to the membrane are treated in the literature.