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Immunohistochemical evaluation of MMP-2, MMP-9 and CD31/microvascular density in squamous cell carcinomas of the floor of the mouth
Fecha
2013Registro en:
Brazilian Dental Journal, Ribeirão Preto, v.24, n.1, p.3-9, 2013
0103-6440
10.1590/0103-6440201301941
Autor
Amado, Flávio Monteiro
Silva, Igor Iuco Castro da
Lima, Cristina Jardelino de
Soares, Fernando Augusto
Kowalski, Luiz Paulo
Granjeiro, José Mauro
Institución
Resumen
The aim of this study was to evaluate the immunoexpression of MMP-2, MMP-9 and CD31/microvascular density in squamous cell carcinomas of the floor of the mouth and to correlate the results with demographic, survival, clinical (TNM staging) and histopathological variables (tumor grade, perineural invasion, embolization and bone invasion). Data from medical records and diagnoses of 41 patients were reviewed. Histological sections were subjected to immunostaining using primary antibodies for human MMP-2, MMP-9 and CD31 and streptavidin-biotin-immunoperoxidase system. Histomorphometric analyses quantified positivity for MMPs (20 fields per slide, 100?points grade, ×200) and for CD31 (microvessels <50?µm in the area of the highest vascularization, 5 fields per slide, 100?points grade, ×400). Statistical design was composed by non-parametric Mann-Whitney U test (investigating the association between numerical variables and immunostainings), chi-square frequency test (in contingency tables), Fisher's exact test (when at least one expected frequency was less than 5 in 2×2 tables), Kaplan-Meier method (estimated probabilities of overall survival) and Iogrank test (comparison of survival curves), all with a significance level of 5%. There was a statistically significant correlation between immunostaining for MMP-2 and lymph node metastasis. Factors associated negatively with survival were N stage, histopathological grade, perineural invasion and immunostaining for MMP-9. There was no significant association between immunoexpression of CD31 and the other variables. The intensity of immunostaining for MMP-2 can be indicative of metastasis in lymph nodes and for MMP-9 of a lower probability of survival O objetivo deste estudo foi avaliar a imunoexpressão de MMP-2, MMP-
9 e CD31/densidade microvascular em carcinomas espinocelulares de
soalho bucal e correlacionar os resultados com variáveis demográficas,
de sobrevida, clínicas (estadiamento TNM) e histopatológicas (grau
de diferenciação tumoral, invasão perineural, embolização e invasão
óssea). Dados de prontuários e de diagnósticos de 41 pacientes foram
revisados. Cortes histológicos foram submetidos à imunomarcação usando
anticorpos primários para MMP-2, MMP-9 e CD31 humanos e sistema
streptoavidina-biotina-imunoperoxidase. Análise histomorfométrica
quantificou a positividade para MMPs (20 campos, grade de 100 pontos
por lâmina, ×200) e para CD31 (microvasos <50 μm na área de maior
vascularização, 5 campos, grade de 100 pontos por lâmina, ×400). O
planejamento estatístico foi composto pelo teste não paramétrico U
de Mann-Whitney (verificação da associação entre variáveis numéricas
e imunomarcações), teste de frequências do qui-quadrado (em tabelas
de contingência), teste exato de Fisher (quando pelo menos uma
frequência esperada foi menor do que 5 em tabelas 2x2), método de
Kaplan-Meier (estimativa de probabilidades de sobrevida global) e teste
de Iogrank (comparação das curvas de sobrevida), todos com nível de
significância de 5%. Houve correlação estatisticamente significante
entre imunomarcação para MMP-2 e metástase em linfonodo. Os fatores
relacionados negativamente com a sobrevida foram estadiamento N,
gradação histopatológica, invasão perineural e imunomarcação de MMP-
9. Não houve associação significativa entre imunoexpressão de CD31 e
as demais variáveis. A intensidade de imunomarcação para MMP-2 pode
ser indicativa de metástase em linfonodo e para MMP-9 de uma menor
probabilidade de sobrevida.