Efeitos do ágar no crescimento de explantes e na formação de calos em morfos pigmentares de Gracilaria domingensis (Kützing) Sonder ex Dickie (Gracilariales, Rhodophyta)

Abstract

Os efeitos da concentração de ágar no crescimento de explantes e na formação de calos foram avaliados em culturas axênicas de gametófitos femininos de morfos de coloração verde e vermelha de Gracilaria domingensis (Kützing) Sonder ex Dickie. Culturas unialgáceas foram mantidas em água do mar esterilizada (30-32 ups) enriquecida com 25% da solução de von Stosch (VSES 25%), 22 ± 2 °C, fotoperíodo de 14 h, irradiância de 50-80 µmol de fótons m-2 s-1. Para a obtenção de explantes axênicos, segmentos apicais e intercalares dos dois morfos foram cultivados por 48 h em meio VSES 25% com adição de uma solução antibiótica e antifúngica, e submetidos a uma lavagem com uma solução de água do mar esterilizada com 0,5% de hipoclorito de sódio e 200 µL L-1 de detergente por 20 segundos. Para avaliar os efeitos da concentração de ágar, os segmentos axênicos foram inoculados em meio ASP 12-NTA com concentrações distintas de ágar que variaram de zero a 1%. A adição de ágar no meio inibiu o crescimento dos segmentos apicais de ambos os morfos, bem como o crescimento de segmentos intercalares do morfo verde. Observou-se uma tendência geral no crescimento dos explantes, onde a taxa de crescimento foi inversamente proporcional à concentração de ágar. A adição de ágar no meio induziu a formação de três tipos de calo, denominados conforme a região do explante onde se originaram: calo apical, calo basal e calo intermediário. As concentrações de 0,5% e 0,7% de ágar foram as concentrações ótimas para indução de calos basais e calos intermediários no morfo verde, respectivamente. A presença de ágar foi essencial para a formação de calos intermediários e apicais. Os resultados indicam que o ágar apresenta um papel na regulação dos processos morfogenéticos em morfos pigmentares de G. domingensis.

The effects of agar concentrations on growth and callus formation were studied in axenic cultures of female gametophytes of green and red morphs of Gracilaria domingensis (Kützing) Sonder ex Dickie. Unialgal cultures of both color morphs were maintained in sterilized seawater (30-32 psu) enriched with a quarter-strength of von Stosch’s solution (VSES 25%), 22 ± 2 ºC, photoperiod of 14 h, irradiance of 50-80 µmol photons m-2 s-1. To obtain axenic explants, apical and intercalary segments of the green and red morphs were cultured for 48 h in VSES 25% medium with addition of antifungal and antibiotic solution, washed with a solution of sterile seawater with 0.5% of sodium hypochlorite and 200 µL L-1 of detergent during 20 seconds. In order to evaluate the effects of agar, apical and intercalary segments were inoculated into modified ASP 12-NTA synthetic medium with agar concentrations ranging from zero to 1.0%. Addition of agar to the culture medium inhibited the growth of apical segments of both morphs as well as the growth of intercalary segments of green morph. In general, growth rates of thallus segments were inversely proportional to agar concentration. Treatments with agar induced the formation of three types of callus, denominated in accordance with the explant region which gave rise to the callus: apical, basal, and intermediate calluses. Moreover, presence of agar is essential to induce intermediate and apical calluses. Concentrations of 0.5% and 0.7% of agar were the optimal values for the induction of basal and intermediate calluses of greem morph, respectively. The results indicated that agar has a regulatory role on morphogenetical processes in color morphs of G. domingensis.