Caracterización funciónal del factor inductor de ovulación presente en el plasma seminal de lllamas

Abstract

Los Camélidos Sud Americanos (CAS) son clasificados como ovuladores inducidos; sin embargo, contrario a lo que se creíatradicionalmente, en las hembras de estas especies la ovulación es inducida por un factor proteico presente en el plasma seminal y no por el estímulo mecánico de la cópula. La administración intramuscular de estefactor inductor de ovulación (FIO) desencadena una rápida alza de la LHplasmática y consecuentemente la ovulación en hembras de la misma especie.El objetivo de los estudios descritos en esta tesis fue adquirir nuevos conocimientos sobre el mecanismo de control de la ovulación enllamas. Estudios en llamas fueron desarrollados para evaluar las características funcionales del factor inductor de ovulación (FIO)presente en el semen de esta especie. Otros estudios fueron diseñados para determinar la presencia del FIO en el plasma seminal de los conejos y evaluar su rol en el mecanismo de inducción de la ovulación en llamas yconejas.El primer estudio fue diseñado para evaluar el efecto del FIO sobre la secreción de LH hipofisiaria en llamas (n=5-6 hembras por grupo) ovariectomizadas (OVX), comparadas con hembras intactas, y por otra parte en llamas OVX pre-tratadas con estradiol 17β (E-17β) o benzoato de estradiol (BE). Se observó un efecto de tratamiento (OIF vs PBS) pero no de la categoría animal (intactas vs OVX), sobre la concentración plasmática de LH, sin embargo, las interacción categoría animal tratamiento y categoría animal tratamiento tiempo tendieron a tener un efecto sobre la concentración plasmática de LH (P=0,08). Elefecto del FIO sobre la secreción de LH fue parcialmente restaurado (P<0,05), a los valores observados en llamas intactas, cuando las llamas OVX fueron pre-tratadas con E-17β o BE.El segundo estudio, contempló 2 experimentos y fue planificado para determinar si el efecto del FIO sobre la secreción hipofisiaria de LH, es mediado por una acción en el hipotálamo o en la hipófisis. Primero, se realizó un estudio para evaluar el efecto de la administración intramuscular de 50, 25, 12,5 o 6,25 μg de acetato de gonadorelina, unagonista de GnRH, sobre la secreción de LH, respuesta ovulatoria y desarrollo y función del cuerpo lúteo (CL) en llamas. La realización de este experimento permitió determinar si era factible disminuir la dosisestándar de gonadorelina (50 μg) utilizada en llamas, sin afectar la respuesta ovulatoria. Llamas tratadas con 50 μg de GnRH presentaron un alza de LH mayor y más prolongada que las hembras tratadas con dosis menores; consecuentemente, la respuesta ovulatoria fue mayor en este grupo de hembras. Por otra parte, no se observaron diferencias en el desarrollo del CL ni en la concentración plasmática de progesterona entre los diferentes grupos. Posteriormente, en llamas (n=7 hembras por grupo) pre-tratadas con un placebo o con el antagonista de GnRH,cetrorelix, se determinó el efecto del FIO o del acetato de gonadorelina (GnRH, 50 μg) sobre la concentración de LH plasmática y la inducción de ovulación. No se observó un alza en la concentración plasmática de LH ni ovulación en ninguna de las hembras pre-tratadas con cetrorelix, independiente del tratamiento (FIO vs GnRH). Por el contrario, tanto FIO como GnRH indujeron un alza de LH plasmático y ovulación en > 85% de las llamas pre-tratadas con el placebo.El tercer estudio fue planificado para evaluar el efecto de la administración intramuscular de plasma seminal de conejo en el alza de LH plasmática y la inducción de ovulación utilizando la llama como unbioensayo de ovulación inducida, y por otra parte evaluar el efecto de diferentes dosis (0,5; 1,0 y 2,0 mL) de plasma seminal de llama y de conejo en la inducción de ovulación utilizando la coneja como modeloanimal. El plasma seminal de conejo indujo un alza de LH y una respuesta ovulatoria comparable a la obtenida con plasma seminal de llama en hembras de esta especie. Además, el desarrollo y función del CL fue comparable en llamas tratadas con ambos tipos de plasma seminal.Por el contrario, ni el plasma seminal de conejo ni de llama, en ninguna de las dosis evaluadas, indujo la ovulación en la coneja. En conclusión, estos estudios demuestran que el factor inductor de ovulación presente en el plasma seminal de las llamas ejerce su efecto estimulador de la secreción de LH hipofisiaria actuando vía sistémica anivel central del eje hipotálamo-hipófisis-gónada, estimulando directa oindirectamente las neuronas GnRH a nivel hipotalámico. Se ha demostrado además, que la acción del FIO es modulada por laconcentración plasmática de estradiol, relevándose el rol modulador delestradiol de origen ovárico. Por otra parte, nuestros estudios demuestranun claro efecto dosis respuesta del agonista de GnRH, acetato de gonadorelina, sobre la secreción de LH hipofisiaria y consecuentemente sobre la respuesta ovulatoria en llamas, sin que se presenten efectos negativos sobre el desarrollo y función del cuerpo lúteo. Por último, se hadeterminado la presencia del factor inductor de ovulación en el plasma seminal de los conejos, resaltándose el hecho de que los factores seminales no tienen la misma relevancia en el mecanismo de inducción deovulación en la coneja, como si lo tienen en la llama.