Papel del transporte y metabolismo de d-glucosa en la expresión y actividad del transportador equilibrativo de nucleosidos 1 (hent1) en endotelió de vena umbilical humana

Abstract

La disminución del transporte total de adenosina por concentración alta de D-glucosa en endotelio de vena umbilical humana (HUVEC) resulta de una menor actividad de transporte del transportador equilibrativo de nucleósidos tipo 1 (hENTI ), fenómeno que está asociadoa un menor nivel de proteína y mRNA del transportador. En este estudio se analizó la participación de mecanismos de regulación de la expresión de hENTI en alta D-glucosa, a través de la actividad transcripcional del promotor del gen SLC29A l (hENTI) y la participación de la captación de D-glucosa vía GLUT y/o la glicólisis. La disminución deltransporte y expresión de hENTI involucró la activación de eNOS, p42/44MAPK y PKC.Alta D-glucosa disminuyó la actividad reportera del promotor del gen SLC29Al (hENTI). Este efecto fue bloqueado por L-NAME (inhibidor de NOS). Alta D-glucosa aumentó la expresión del factor transcripcional Spl y la unión de Spl y ZBP-89 al promotor, fenómenos que fueron bloqueados por L-NAME. La sobreexpresión de Spl disminuyó la actividad del promotor de SLC29Al, efecto que se revirtió por L-NAME. La mutación delos sitios consensos para Spl y ZBP-89 bloqueó el efecto de alta D-glucosa. HUVEC expresan GLUTI cuya actividad y expresión disminuyeron en alta D-glucosa, efectos que fueron bloqueados por insulina. La inhibición del transporte de D-glucosa y la enzima GAPDH bloqueó la disminución de la actividad y expresión de hENTI por alta D-glucosa. Así, en este estudio se demostró que el transporte y metabolismo de D-glucosa son fenómenos que participan en el efecto inhibitorio de alta D-glucosa sobre la actividad yexpresión de hENTI. Además, se propone que los factores de transcripción Spl y ZBP-89, en forma dependiente de NO, participarían en este fenómeno en HUVEC.