Informe Final
DESARROLLO DE NUEVOS PRODUCTOS PARA EL DIAGNOSTICO Y TERAPIA DEL CANCER
Institución
Resumen
El proyecto cumplió todos los objetivos propuestos. El desarrollo de un kit para el diagnostico precoz de cancer de cuello uterino fue ensayado en un estudio retrospectivo que incluyeron muestras de cuello normales, CIN I, CIN II, CIN III y carcinoma. Estas muestras se obtuvieron de dos servicios de anatomía patológica y los resultados fueron evaluados por dos patólogos independientes. Como conclusión final, el sncmtrna-2 (correspondiente al chrna-2 del proyecto original) se expresa solo en , CIN I Y II Y NO CIN III, cuello normal o carcinoma. Muchos centros de investigación clínica en el mundo han buscado por años un marcador temprano de neoplasia, y en el caso de cuello, un marcador que permita diferencia entre LSIL y HSIL. Este putativo marcador tiene una enorme importancia clínica por las consecuencias que tiene en prevención. Por lo tanto hemos logrado establecer que el sncmtrna-2 constituye el primer marcador de neoplasia temprana de cáncer de cuello. Estos resultados serán publicados en una revista con alto impacto sobre todo para especialistas clínicos (Villota et al., 2009, immortalization of human keratinocytes induces the expression of new non-coding mitochondrial rna). Es interesante destacar que el sncmtrna-2 también lo hemos encontrado en neoplasias tempranas de próstata (pin) y no en próstata normal o en carcinoma. Además, estudios preliminares en mama también indican que este transcrito se expresa en neoplasias tempranas. En conjunto, estos resultados del proyecto sugieren fuertemente que hemos descubierto un marcador universal de neoplasias tempranas.en relación al objetivo terapia antineoplasica selectiva el proyecto permitió determinar los siguientes avances: 1) determinar las regiones óptimas de los ncmtrnas como blancos para terapia utilizando oligonucleótidos antisentido o sirna. 2) determinar los mejores métodos de transfección. 3) se determino que las células tumorales mueren por apoptosis y autofagia. 4) se determino la estructura de los ncmtrnas sentido y antisentido del ratón, lo cual tiene importancia fundamental para estudios preclínicos en animales. 5) en estudios in vivo se logró evitar el crecimiento de un mieloma en ratones. Mientras los ratones controles (sin tratamiento u odn no rleacionado) murieron entre 15 y 21 días post inyección de 2 millones de células nso2, los ratones tratados con un oligo complementario a los ncmtrna antisentido llevan más de 180 días de sobrevida y totalmente sanos.en diagnostico de cancer urogenital se desarrollo una metodología para detectar células tumorales en orina basada en la detección diferencial de los ncmtrnas sentido y antisentido mediante hibridación in situ. La presencia de células tumorales en la orina es fácilmente detectada por las células que no expresan los ncmtrna antisentido. Esta misma tecnología se desarrollo para la deteccción de celulas neoplasicas en sangre, permitiendo una fácil detección de células leucémicas. Derivado de estos resultados se está desarrollando un método alternativo basado en la amplificación de estos transcritos con una enzima (DNA polimerasa BST) que tiene una gran capacidad de replicar cdnas que contengan horquillas muy estables (evita “replication slippage”) como es el caso de los ncmtrnas. Fuera de la alta capacidad de detección de esta técnica, es de un costo bastante menor que usar PCR pues no se necesita equipamiento de alto costo.finalmente hay que destacar que debido a los avances logrados en el proyecto, mas el patentamiento en varios países, se creó hace aproximadamente un año un “spin-off”. Esta nueva empresa, Andes Biotechnologies S.A. solo se dedicara a continuar las investigaciones y desarrollo de los RNA no codificantes humanos y de ratón (estudios pre-clínicos) para el diagnostico y terapia del cáncer. Esta empresa cuenta con la importante incorporación como socios a empresas chilenas de inversiones más algunos socios menores