Las benzodiacepinas son medicamentos ampliamente conocidos para manejar la ansiedad, el insomnio, la epilepsia, los espasmos musculares y algunos trastornos psiquiátricos. En Colombia, son las sustancias que más se utilizan con fines delictivos, dada la capacidad de poner a la víctima en incapacidad de resistir [1]. Las benzodiacepinas son fármacos depresores del Sistema Nervioso Central, ansiolíticos, sedantes e hipnóticos. Regularmente de utilidad clínica, se presentan en pacientes psiquiátricos. Importantes en el ámbito forense debido a su participación activa, en países como Colombia, en delitos sexuales y hurtos, donde se convierten en las sustancias de elección para poner en estado de indefensión a las personas, muy a pesar de ser controladas [1]. Dada al uso que se le ha dado a las Benzodiacepinas en Colombia y la importancia de estas para los análisis forenses el Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses Regional Occidente tiene el deber de que todo sus análisis forenses posean estándares internacionales de calidad, para la identificación y cuantificación de Benzodiacepinas y sustancias relacionadas que conduzca a la correcta interpretación forense de sus resultados y que dichos resultados sean fiables. Este proyecto pretende validar el método de extracción y la técnica instrumental para el análisis de Benzodiacepinas (análisis cualitativo de las muestras de orina por Cromatografía de Gases acoplado a Espectrometría de Masas) utilizada en el laboratorio de Toxicología Forense del Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses Regional Occidente, para que pueda ser introducido como prueba en procedimientos penales, administrativos, contravencionales, de familia y otros bajo el Sistema Penal Acusatorio Colombiano.