masterThesis
Análise da produção extracelular da proteína L1 de HPV 16, a partir da construção PICZAαL1H16 em células de Pichia pastoris
Registro en:
Barbosa Gomes, Felippe; Carlos de Freitas, Antonio. Análise da produção extracelular da proteína L1 de HPV 16, a partir da construção PICZAαL1H16 em células de Pichia pastoris. 2011. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Inovação Terapêutica, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2011.
Autor
GOMES, Felippe Barbosa
Institución
Resumen
O câncer cervical é a segunda maior causa de mortes entre mulheres no mundo. Esta
neoplasia maligna está relacionada com a presença do Papilomavírus Humano (HPV), sendo o
tipo 16 responsável por 60% dos casos. O HPV infecta o tecido epitelial mucoso ou cutâneo e
é responsável pelo aparecimento de verrugas ou papilomas benignos que tendem a regredir
naturalmente na maioria dos casos, mas que ainda assim causam prejuízos aos indivíduos
infectados e aos sistemas públicos de saúde, sendo a papilomatose considerada a doença
sexualmente transmissível mais prevalente no mundo, tornando essencial a aplicação de
estratégias de combate à esta infecção. Vacinas baseadas em Virus-like particles (VLPs),
formadas a partir das proteínas capsidiais L1 e L2 - que induzem a formação de anticorpos
neutralizantes - já estão comercialmente disponíveis. Contudo, possuem um preço elevado
considerando, principalmente, os países em desenvolvimento. A imunidade humoral é
direcionada contra os epítopos conformacionais da proteína L1 que compõe 90% da estrutura
capsidial. Para produção das VLPs os genes das proteínas capsidiais são expressos em
sistemas heterólogos e o produto resultante é purificado. A escolha de um sistema mais
simples e barato para essa expressão é fundamental para a redução do custo das vacinas. Uma
alternativa promissora é a levedura Pichia pastoris. Este trabalho propôs a produção
extracelular da proteína L1 de HPV16, que teve seu gene inserido no vetor pPCIZAα. A
construção pPICZAαL1H16 foi integrada no genoma da levedura Pichia pastoris e a
transcrição do gene L1 e a expressão da proteína foram confirmadas por RT-PCR e
imunodetecção em Dot Blot. A expressão extracelular da proteína L1 de HPV 16, em células
de P. pastoris, é uma etapa essencial na busca do desenvolvimento de uma estratégia vacinal
mais economicamente viável baseada em VLPs Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior