masterThesis
Aplicação da citometria de fluxo no diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana
Registro en:
Pereira de Oliveira, Andresa; Rêgo Alves Pereira, Valéria. Aplicação da citometria de fluxo no diagnóstico da leishmaniose tegumentar americana. 2011. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Inovação Terapêutica, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2011.
Autor
Pereira de Oliveira, Andresa
Institución
Resumen
A LTA é uma infecção parasitária tendo Leishmania (Viannia) braziliensis) como
agente etiológico de maior incidência no Brasil. Em todas as formas clínicas da doença,
sabe-se que a resposta imune é dependente de células T. Embora estudos avaliem a
resposta humoral na LTA, ainda não está esclarecido o papel de anticorpos específicos
na imunidade contra Leishmania. Além disso, o diagnóstico da LTA demonstra
dificuldades pois o mesmo é realizado por associações clínicas, epidemiológicas e
laboratoriais. Considerando os benefícios da citometria de fluxo, uma nova abordagem
utilizada na pesquisa de anticorpos com aplicabilidade superior aos diferentes
protocolos de detecção e revelação convencionais, este estudo trouxe uma alternativa
através da pesquisa de anticorpos IgG de L(V)braziliensis, aplicável ao diagnóstico da
LTA e critério de cura.O objetivo deste estudo foi comparar as técnicas de reação de
imunofluorescência indireta (IFI) e citometria de fluxo na avaliação clínica-laboratorial
dos pacientes antes e após cura clínica e avaliar a aplicabilidade da citometria de fluxo
no monitoramento pós-terapêutico dos pacientes. Soros de 14 pacientes antes do
tratamento (AT), 13 pacientes 1 ano após tratamento (PT), 10 pacientes 2 e 5 anos PT
foram analisados e os resultados foram expressos em níveis de reatividade de IgG, a
partir da porcentagem de parasitos fluorescentes positivos (PPFP). A diluição 1:256 das
amostras permitiu diferenciar os indivíduos AT e PT. A análise comparativa da IFI e da
citometria de fluxo pela curva ROC (Receiver Operating Characteristic Curve)
demonstrou, respectivamente, ASC (área sob a curva) =0,78 (IC95%= 0,64-0,89) e
ASC=0,90 (IC95%= 0,75-0.95), demonstrando elevada acurácia do teste de citometria de
fluxo. Nossos dados demonstram que 20% foi o melhor ponto de corte identificado pela
curva ROC para o ensaio de citometria de fluxo. Este ensaio apresentou sensibilidade
de 86% e especificidade de 77%, enquanto a IFI apresentou sensibilidade de 71% e
especificidade de 69%. O monitoramento pós terapêutico através da análise comparativa
dos índices de desempenho das técnicas em 1, 2 e 5 anos PT, revelou melhor
desempenho da citometria de fuxo em relação a IFI. Portanto, a citometria de fluxo
demonstrou ser uma alternativa diagnóstica aplicada ao estudo da LTA e que as
informações obtidas nesse estudo abrem perspectivas para o monitoramento de cura
pós- terapêutica da LTA Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco