O advento da creditação e a busca para determinar a qualidade dos dados produzidos vêm aumentando a demanda para validação de métodos de controle de qualidade laboratorial. O limite mínimo de detecção (LOD) é a menor concentração de um analito que pode ser mensurada, estabelecendo desta forma o ponto onde a análise é possível. Baseado nisto objetivou-se desenvolver metodologia para estabelecimento do limite mínimo de detecção de métodos de análise de Salmonella spp. aplicados a alimentos. Inicialmente foi estabelecida a cinética de uma cepa de Salmonella typhimurium ATCC 14028 por um período de 24 horas através da contagem de bactérias (UFC/mL) e leitura da densidade óptica (absorbância) para observação do desenvolvimento do microrganismo em estudo. Os dados experimentais foram ajustados matematicamente pelos modelos de Baranyi e quadrático. Com base na curva padrão foi possível determinar o tempo de incubação necessário para o inóculo atingir a fase estacionária. A partir deste, foram realizadas diluições seriadas até 10-11 das quais as quatro ultimas diluições e a amostra branco foram analisadas concomitantemente por métodos AOAC 967.26 (tradicional) e AOAC 996.08 (rápido). O LOD para os métodos testados foi encontrado na faixa de 1 a 8 UFC/25mL de amostra, não apresentando diferença significativa entre eles (p< 0,05). Na validação do método proposto foi obtida sensibilidade de 100% para ambos os métodos e precisão de 95% para o tradicional e 96,25% para o rápido. Os resultado demonstraram a aplicabilidade do modelo quadrático utilizado no ajuste da cinética microbiana e a metodologia proposta para limite mínimo de detecção aplicada aos métodos de detecção de Salmonella spp. foi satisfatória podendo ser aplicada na rotina laboratorial assegurando maior confiabilidade nos resultados dos ensaios microbiológicos, atendendo as exigências dos protocolos para creditação laboratorial