masterThesis
Construção de vetores para modificação genética de linhagens industriais de Saccharomyces cerevisiae
Registro en:
Cristina Bezerra Leite, Fernanda; Antônio de Morais Júnior, Marcos. Construção de vetores para modificação genética de linhagens industriais de Saccharomyces cerevisiae. 2008. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Genética, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2008.
Autor
LEITE, Fernanda Cristina Bezerra
Institución
Resumen
Sistemas de expressão heteróloga em Saccharomyces cerevisiae têm sido descritos, porém
apresentam algumas desvantagens quando utilizados em linhagens industriais: (1) a marca de
seleção é baseada em supressão de auxotrofia ou resistência a compostos químicos; (2) a
marca de seleção nem sempre é excisável; (3) o alvo de integração geralmente não é multicópia;
(4) os vetores ainda possuem seqüência bacteriana. Neste trabalho, construímos um
novo sistema para modificação de linhagens industriais de S. cerevisiae que obedecem aos
requisitos para utilização de OGM s na indústria: linhagem modificada sem marca de
resistência a antibióticos, não portadora de seqüências de origem bacteriana e seqüências
integradas derivadas de organismos GRAS (Generally recognized as safe). Este sistema pFB,
composto por dois vetores pFB-LAC4 e pFB-LAC12, combina o método de seleção por
complementação metabólica para lactose com a utilização do DNA ribossomal como alvo de
integração por recombinação homóloga resultando num sistema de modificação com seleção
limpa (ecologicamente correta), de integrações estáveis e re-utilizável numa mesma
linhagem. Este sistema permite a modificação genética de linhagens industriais de S.
cerevisiae para expressão heteróloga e/ou modificações de vias metabólicas permitindo o
melhoramento ou introdução de vias bioquímicas nestas linhagens. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior