masterThesis
Análise da expressão e investigação de mecanismos envolvidos com o controle da atividade de homólogos do fator de iniciação da tradução eIF4E ao longo do ciclo de vida de Leismania amazonensis
Registro en:
Marques Coutelo Pereira, Mariana; Pompílio de Melo Neto, Osvaldo. Análise da expressão e investigação de mecanismos envolvidos com o controle da atividade de homólogos do fator de iniciação da tradução eIF4E ao longo do ciclo de vida de Leismania amazonensis. 2008. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Genética, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2008.
Autor
Marques Coutelo Pereira, Mariana
Institución
Resumen
Os tripanossomatídeos são protozoários que causam manifestações
clínicas de impacto mundial e possuem características bioquímicas
peculiares que os diferem dos demais eucariotos. Sua expressão gênica é
regulada em nível pós-transcricional, provavelmente no estágio de
iniciação da síntese protéica. A tradução cap-dependente é iniciada
através da ligação do fator de iniciação eIF4E, pertencente ao complexo
eIF4F, ao cap presente na extremidade 5 dos mRNAs. Foram identificados
múltiplos homólogos do fator EIF4E nestes parasitas, que provavelmente
estão associados ao seu complexo ciclo de vida. Neste trabalho, nós
buscamos entender como ocorre a expressão de quatro homólogos deste
fator (EIF4E1-4) durante o ciclo de vida de Leishmania amazonensis. Para
tal, foram realizadas curvas a fim de se obter as três principais formas
evolutivas do parasita. Todos os homólogos estão presentes ao longo da
curva e os EIF4E2-4 apresentam múltiplas isoformas, sugerindo
modificações pós-traducionais por fosforilação. Destes, as isoformas dos
EIF4E3 e 4 apresentaram expressão constrastante que não interferem
com sua localização subcelular, citoplasmática. A ausência de soro fetal
bovino no meio induziu uma desfosforilação prematura do EIF4E4 e uma
hiperfosforilação do EIF4E3, associados à falta de crescimento celular.
EIF4E3 desfosforilado e EIF4E4 fosforilado estão associados a uma
maior atividade de tradução. A presença de um inibidor de transcrição
influenciou no padrão de expressão dos dois homólogos, porém um
inibidor de tradução afetou apenas o EIF4E3. Estes resultados indicam que
os homólogos de eIF4E atuam de forma distinta na célula e que a
fosforilação deve ter um papel significante na regulação destes fatores em
Leishmania e na regulação da síntese de proteínas como um todo Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico