masterThesis
Bioconjugados de nanopartículas semicondutoras fluorescentes de CdTe/CdS com albumina sérica bovina: síntese e caracterização
Registro en:
Higia Gomes Carvalho, Kilmara; Saegesser Santos, Beate. Bioconjugados de nanopartículas semicondutoras fluorescentes de CdTe/CdS com albumina sérica bovina: síntese e caracterização. 2010. Dissertação (Mestrado). Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2010.
Autor
Higia Gomes Carvalho, Kilmara
Institución
Resumen
Nanopartículas fluorescentes de materiais semicondutores, também conhecidas
como pontos quânticos (PQs), apresentam-se como uma alternativa promissora em
biomarcação frente aos fluoróforos convencionais. Contudo, para tal, faz-se
necessário que pesquisas sejam direcionadas para suprir os problemas relacionados
à bioconjugação, tais como: (1) obtenção de PQs funcionalizados robustos e
reprodutíveis, (2) desenvolvimento de técnicas de conjugação flexíveis e, (3)
aplicação de novos métodos para a caracterização do bioconjugado. Nesse sentido,
a albumina sérica bovina (ASB), uma proteína plasmática, foi escolhida como
sistema modelo para o desenvolvimento de um protocolo de bioconjugação, visando
a preparação de imunocomplexos baseados em ligantes bioespecíficos, a serem
empregados em fluoroimunoensaios heterogêneos (FIH) para o diagnóstico de
doenças através de testes sorológicos. No presente trabalho foram sintetizadas
dispersões coloidais core-shell (núcleo-casca) do tipo II-VI de Telureto de
Cádmio/Sulfeto de Cádmio (CdTe/CdS) em meio aquoso com as quais realizou-se o
processo de conjugação com ASB via agentes de comprimento zero. No estudo do
CdTe/CdS, as propriedades estruturais foram estimadas utilizando-se microscopia
eletrônica de transmissão convencional e de alta resolução e difração de Raios-X
(dmédio = 3 nm, estrutura cúbica tipo blenda de Zinco). As propriedades ópticas
(absorção, emissão e excitação) evidenciaram intensidade de emissão máxima na
região entre 520 a 550 nm. Os PQs de CdTe/CdS foram empregados em marcações
de formas promastigotas de Leishmania chagasi e linfócitos para investigar sua
viabilidade, e analisados por microscopia confocal e citometria de fluxo,
respectivamente. A obtenção do conjugado CdTe/CdS-ASB foi evidenciada por
detecção quantitativa de fluorescência em placas de poliestireno como substrato,
comumente usadas em FIH. Estes bioconjugados foram caracterizados por
dicroismo circular e técnicas espectroscópicas. Os resultados revelaram um
protocolo de bioconjugação eficiente para o CdTe/CdS-ASB e sua confirmação por
uma análise rápida, simples e de baixo custo, bem como êxito no emprego de PQs
de CdTe/CdS como biomarcador Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico